【摘要】 目的 观察抗小叶增生合剂对乳腺增生病动物模型的治疗作用。方法 采用苯甲酸雌二醇联合黄体酮肌注的方法，复制大鼠乳腺增生模型，用抗小叶增生合剂30.0，15.0，7.5ml/kg 3个剂量治疗30天，测定大鼠乳头直径，观察乳头大体形态变化及显微镜下乳腺组织变化，观察对血液流变学的影响；测定血清苯甲酸雌二醇含量。结果 抗小叶增生合剂能明显减小大鼠增生乳头直径，减少乳腺小叶数、腺泡数和腺泡腔直径，改善血液流变学参数，显著减轻乳头形态学症状和降低血清苯甲酸雌二醇含量。结论 抗小叶增生合剂对雌激素引起的大鼠乳腺增生病有较好的疗效。
【关键词】 抗小叶增生合剂 乳腺增生 雌激素类 大鼠
Abstract: Objective To observe the effect of Kangruxianxiaoyezengsheng on rats with mastoplasia. Methods After benzoate estradiol and progestogen had been injected into rats， the mastoplasia models were produced. The model rats were treated with Kangruxianxiaoyezengsheng (30.0， 15.0， 7.5ml/kg) for 30 days， the mammary papilla diameter of the rats in all groups were measured， morphologic changes of mammary papilla and the changes of mammary gland were observed under microscope， the content of estradiol in blood serum and blood rheology were determined by radio-immunity. Results Kangruxianxiaoyezengsheng could significantly shrink the mammary papilla's diameter of the mastoplasia rats， lessen mammary papilla's symptoms in morphology， reduce the quantity of lobule of mammary gland， lobule-alveolus in mammary gland and the diameter of acinar lumina. Kangruxianxiaoyezengsheng could also significantly improve blood rheological nature and reduce content of estradiol in blood serum. Conclusions Kangruxianxiaoyezengsheng can be effective for rat's mastoplasia induced by benzoate estradiol.
Key words: Kangruxianxiaoyezengsheng; mastoplasia;estrogens;rats
乳腺增生是妇女乳房疾患中的常见病、多发病，临床上以乳痛、乳腺组织局部增厚或有多个大小不等的结节为主要症状，在病理上以上皮增生、纤维组织增生及部分以淋巴细胞为主的炎性细胞浸润为主要变化的疾病，其患病率有逐渐增高趋势。抗乳腺小叶增生合剂是按我院的协定处方煎煮而成，处方由当归、柴胡、白芍等八味药材组成，方中当归、柴胡为君药，具有活血化淤，通络止痛作用。本研究选用苯甲酸雌二醇联合黄体酮长期大量刺激造成大鼠乳腺增生模型，观察中药抗乳腺小叶增生合剂对大鼠乳腺增生的影响。
1 材料与方法
1.1 动物
选用成年雌性未孕Wista大鼠(由广西医科大学实验动物中心提供，合格证号：SYXK桂2003-0005)72只，体重180～200g。
1.2 药物及试剂
抗乳腺小叶增生合剂，本院制剂室提供;苯甲酸雌二醇注射液10mg/ml，上海第九制药厂生产；黄体酮注射液1mg/ml，浙江仙琚制药股份有限公司生产；雌二醇放射免疫分析药盒，天津九鼎医学生物工程有限公司产品；肝素钠注射剂，2ml(12 500u)，江苏万邦生化制药有限公司生产。
1.3 仪器
LBY-N6B全自动清洗血流变仪，北京普利生仪器有限公司;FJ2008G Y免疫计数器，西安262厂。
1.4 造模［1］
实验大鼠72只，其中对照组15只，另57只大鼠用于造模，每只大鼠后肢肌肉注射苯甲酸雌二醇注射液0.5mg/(kg·d)，共30天，改用黄体酮注射液4mg/(kg·d)肌肉注射，共5天，可见乳头出现红、肿和增大，并有部分乳晕出现，处死4只(对照组和造模组各2只)送病理切片检查，确证造模成功。
1.5 分组及治疗
将造模大鼠随机分为5组：即模型组(A组)、对照组(B组)及抗乳腺小叶增生合剂高(C组)、中(D组)、低剂量组(E组)，给药剂量分别为30.0，15.0，7.5ml/kg，相当于成人临床拟用剂量的10倍、5倍及2.5倍；对照组给蒸馏水，每天1次，共30天。
1.6 观察指标
末次给药24h后，乙醚麻醉，腹主动脉取血，留取血液及双侧乳房，采用肝素钠抗凝，离心提取血浆，用LBY-N6B全自动清洗血流变仪测全血黏度及血浆黏度，用压积管法测红细胞压积；用FJ2008GY免疫计数器检测血浆中苯甲酸雌二醇含量。用精密游标卡尺测定各组大鼠前第二对左右乳头直径，并进行形态学肉眼大体观察，进行4级半定量分析。其形态观察评级标准分为4级:Ⅰ级:乳头红、肿大明显，解剖可见乳腺组织明显增大。乳房连接成片，分界不清;Ⅱ级:乳头肿大，解剖可见乳腺组织明显增大，乳房呈片状，但分界尚清;Ⅲ级:乳头稍增大，解剖可见乳腺组织明显增大，分界清楚;Ⅳ级:无变化，乳腺组织很少。在10%中性福尔马林中固定后，常规石蜡包埋、切片，HE染色，光镜观察。乳腺小叶增生程度评分标准按4级半定量评分［2］
1.7 统计学处理
用SPSS 12.0统计软件包处理数据。等级比较采用Ridit分析，计量资料采用t检验。
2 结果
2.1 各组大鼠乳头直径大小变化及血清苯甲酸雌二醇含量比较 D、C、E三组大鼠乳头直径比A组减小；雌二醇含量明显减少(P&<0.05或P&<0.01)，见表1。表1 各组大鼠乳头直径大小变化及血清苯甲酸雌二醇含量测定比较 (略)
2.2 各组大鼠乳头形态学观察评级及病理组织学变化评分比较
C、D、E三组形态观察评级与A组比较差异有高度显著性(P均&<0.01)；病理组织学变化评分与A组比较差异也有显著性(P均&<0.05)，见表2，表3。表2 各组大鼠乳头形态学的变化（略）表3 各组大鼠病理组织学变化评分（略）
2.3 各组大鼠血液流变学参数的变化
C组全血黏度、血浆黏度、红细胞压积比A组明显降低；D、E组除血浆黏度，E组除红细胞压积与A组比较差异无显著性外，其余指标差异均有显著性(P&<0.05或P&<0.01)，见表4。表4 抗小叶增生合剂对大鼠血液流变学参数的变化（略）
3 讨论
根据本病的症候学特点，祖国医学将其划归“乳癖”范畴，多由肝气郁结、思虑过度而伤脾胃，所致肝郁痰凝或冲任失调，经脉气血运行不畅，以致气、血、痰、瘀互结而成肿块。现代医学认为，乳腺增生病的发生与内分泌功能紊乱，卵巢功能失调，致使体内雌激素、孕激素以及垂体催乳素，促卵泡成熟激素等的紊乱有关［3］，当雌二醇过度刺激时，可促使乳腺导管上皮和乳腺小叶的腺泡发育增多，伴有小叶腺泡数增多，使乳腺组织从正常到增生。因而雌二醇配合黄体酮肌注成为常用的乳腺增生造模方法。抗小叶增生合剂具有活血化瘀、疏肝解郁、消肿止痛的作用，在其所含中药成分中，当归有补血、活血、调经止痛等作用，当归的主要成分是阿魏酸，阿魏酸具有抑制血小板聚集、促进血小板解聚、抗血栓、抗氧化和自由基、解除血管平滑肌痉挛、提高膜稳定性，以及抗炎、镇痛、调节免疫等药理作用；柴胡具有镇静、镇疼、解热、抗炎、防止纤维增生等作用；白芍可养肝体、敛肝气、缓肝急、补肝阴、平肝阳、调血海而止疼痛；白芷解表散风，通窍，止痛，消肿排脓；元胡、丹参、田七有活血祛瘀的作用；生牡蛎味咸、涩，性微寒，入肝肾经，本品为贝壳之属，质体重坠，能平肝潜阳，能增加软坚散结的效果。在本研究中，经服用抗乳腺小叶增生合剂治疗的绝大多数患者症状消失，肿块质地软化，服用抗小叶增生合剂后，大鼠增生的乳房直径与模型组比明显减小，乳头形态学症状显著减轻，血清雌二醇含量显著降低，组织切片中的乳腺小叶数目明显减少，小叶腺泡数减少，腔内分泌物少，说明抗小叶增生合剂对大鼠乳腺组织病理改变有明显减轻或促进其组织病理病变的恢复作用。乳腺增生病患者血液流变性呈高黏状态［4］，本研究表明乳腺增生大鼠血液流变性也发生变化，而服用抗小叶增生合剂后能明显降低乳腺小叶增生大鼠全血和血浆黏度比，降低红细胞压积，表明活血化瘀作用也是抗小叶增生合剂治疗乳腺增生病的机制之一。
参考文献
［1］饶金才，李兰珍，陈云生，等.乳腺增生病动物模型的复制与病理类型［J］.中国病理生理杂志，1992，8(6):671-672.
［2］SUN Qingguo， AN Bingyin， WANG Jianjun， et al. Experimental study of rufukang tablets on hyperplasia of mammary gland ［J］. Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae，2000，60(1):40-41.
［3］武守国，王宽宇，尹志伟.乳腺康胶囊治疗乳腺增生病的血清和血液流变学研究［J］.中医药学刊，2006，26(4):648-649.
［4］蒋时红，刘旺根，杨丽萍，等.桂枝茯苓胶囊对大鼠乳腺增生病治疗作用的实验研究［J］.中成药，2004，26(12):1040-1042.