作者：练有文，王晖，倪少凯，欧超伟，李志东，欧阳轶强，钟康银
【摘要】 目的 观察不同饲养密度对SPF级BALB/cA裸小鼠血液生化指标的影响。方法 取4周龄刚离乳的BALB/cA裸小鼠186只，雌雄各半，分1只/笼的14笼，2只/笼的14笼，4只/笼的8笼，8只/笼的6笼，16只/笼的4笼等5个饲养密度组饲养在M1型小鼠饲养笼至70 d，取血清测定血液生化值并比较结果。结果 4只/笼组的血液生化指标与低密度组(1只/笼、2只/笼)、密度稍大饲养组(8只/笼)相差不大，与高密度饲养组(16只/笼)相差较大。 结论 饲养密度对实验动物的血液生化指标有影响。
【关键词】 饲养密度;SPF级;BALB/cA裸小鼠;血液生化
Abstract: Objective To observe the influence of rearing density on blood biochemical parameters in SPF BALB/cA nude mice. Methods A total of 186 fourweekold BALB/cA nude mice were randomly pided into 5 groups of different rearing density (1， 2， 4， 8 and 16 mice per cage) and fed in M1 type cages. After 70 days， blood biochemical indices were measured in all groups. Results The biochemical parameters in middle density group (4～8 mice per cage) were similar to those in low density group (1～2 mice per cage)， but different from those in high density group (16 mice per cage). Conclusion The rearing density may have some impact on the blood biochemical parameters in laboratory animals.
Key words: rearing density; SPF; BALB/cA nude mice; blood biochemistry
无胸腺裸鼠(简称裸鼠)目前已成为医学生物学领域中不可缺少的实验动物，尤其是在肿瘤学、免疫学方面的研究和药品与生物制品的安全性方面的评价以及有效药品的筛选等实验方面，它都具有特殊的价值[1]。血液生化指标是病理学、生理学、药物毒物学等研究和医学临床诊断的常用指标[2]，特别是以裸鼠作为实验动物进行论文设计时其生化指标正常参考值更有重要意义。有关BALB/cA裸小鼠血液生化指标正常参考值与饲养密度的关系目前尚末见文献报道。本文将SPF级BALB/cA裸小鼠分成5个饲养密度进行饲养，对它们的12项血液生化指标进行了检测和比较，现将结果报道如下。
1 材料和方法
1.1 实验动物
健康刚离乳的4～5周龄SPF级BALB/cA裸小鼠(nu/nu)186只(实验动物质量监测合格证：粤检证字2005A025号)，雌雄各半，由广东医学院实验动物中心SPF室提供。
1.2 实验仪器
美国贝克曼(BKM)公司生产的LX20全自动生化分析仪。
1.3 实验方法
1.3.1分组 186只BALB/cA裸小鼠，分成5个饲养密度组：1只/笼的14笼(14只)，2只/笼的14笼(28只)，4只/笼的8笼(32只)，8只/笼的6笼(48只)，16只/笼的4笼(64只)，每组雌雄各半，饲养在小鼠饲养笼M1型中。
1.3.2 饲养方法 在广东医学院实验动物中心SPF室动物实验室饲养(动物实验环境设施监测合格证合格证：粤检证字2005C055号)，饲料采食广东省医学实验动物中心生产的鼠料，饮用水为经酸化(pH：2.8～3.0)过滤的自来水，饮用前加入适量的复合维生素B，饲料和水自由摄取。每周每笼加喂两次1/4个熟鸡蛋，每只裸小鼠加喂8粒葵花籽，饲养至70日龄。水瓶和笼具每周更换1～2次，进入屏障系统的物品和用具均进行严格的消毒，所有的工作严格按屏障系统的运行和操作程序进行运作[3]。
1.3.3 血液生化指标测定 70日龄实验小鼠禁食12 h后，摘眼球采血，室温3000 r/min离心15 min，分离血清。采用LX20全自动生化分析仪检测以下指标：谷丙转氨菌(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆红素(TB)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、尿素氮(BUN)、尿酸(SUA)、肌酐(Scr) 、葡萄糖(GLU)、胆固醇(CHOL) 、甘油三脂(TG)等12项指标。
1.4 统计学处理
血液生化值结果以±s表示，采用SPSS13.0统计软件包行单因素方差分析及q检验。
2 结果
不同饲养密度的BALB/cA裸小鼠血液生化指标中，有7项指标(ALP、TB、Scr、CHOL、TG、ALT、BUN)统计学差异有意义(P&<0.01或0.05);其余的5项(AST、TP、ALB、SUA、GLU) 差异无统计学意义(P&>0.05)。BALB/cA裸小鼠不同饲养密度12项血液生化指标测定结果见表1。表1 不同饲养密度BALB/cA裸小鼠血液生化指标检测结果的比较和1只/笼比较：aP&<0.05，bP&<0.01;和2只/笼比较：cP&<0.05，dP&<0.01;和4只/笼比较：eP&<0.05，fP&<0.01;和8只/笼比较：gP&<0.05，hP&<0.01。
3 讨论
BALB/cA裸小鼠是发现较早，使用量较多的品系，也是我国目前使用最广泛的品系，作为实验动物现己形成一定规模，其群体和生物学特性和健康状况也相对稳定。本文对BALB/cA裸小鼠进行了血液生化指标的测定，所提供的正常值数据是可靠的，对其在生物医学领域中的应用提供了重要的基础数据。
本文分笼饲养的BALB/cA裸小鼠个数按一定的曲线进行设计，分别是1、2、4、8、16个，呈等比增加，在饲养环境因素(如光照、温度、湿度等)等同、动物取血方法一致的前提下，观察了12项血液生化指标，并进行了统计学分析，因而，我们认为所得到的结果对各类论文的设计是有参考意义的。
本文结果表明：正常饲养密度组(4只/笼，0.0067～0.0135 m2/只)和低密度的饲养组(单笼、双笼)、密度稍大饲养组(8只/笼)的血液生化指标较为接近，只有个别的指标(ALT、ALP)差异稍大;而高密度饲养组(16只/笼)的一部份生化指标(除AST、TB、ALB、BUN、GLU、CHOL)与正常饲养密度组(4只/笼)的差异较大，显示实验动物的饲养密度对血液生化值有一定的影响，提示进行动物实验的研究人员必须注意动物实验的饲养密度。我们认为在进行动物实验时，实验动物饲养密度可低不可高，尽可能按正常饲养密度进行实验操作，以确保实验结果的准确可靠性。
另外，本文的ALT、AST、TB、GLU、ALB、CHOL、TG值与王冬平等[4]报道的有关BALB/c突变小鼠的资料比较，BALB/cA裸小鼠的ALT、AST、TB、GLU偏高，ALB、CHOL、TG偏低;与汤百争等[5] 报道的BALB/cHSF1 knockout小鼠血液生化值比较普遍偏低，只有ALT、AST偏高。原因可能是实验动物血液生化测定易受样品采集、贮存方法、所采用仪器等人为因素，以及动物品种、品系、年龄、性别等动物自身因素影响[6-8]。因此，各实验室得出的结果往往不一致。在目前尚没有一个公认的正常值的情况下，积累较多数量动物的实验数据，作为本实验室的历史对照值及安全性评价的判断标准，才能得出比较确切的结论[9]。
本文结果还表明， BALB/cA小鼠在自由采食情况下，高密度组(16只/笼)的CHOL和TG 比其它组别高出许多，可能是动物饲养密度不同造成活动空间不同，从而使得运动量不同所致。
参考文献
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