作者：张越明， 陈志明， 雷 静， 张家训， 王红娅， 张居慧， 张菊红
【摘要】 目的 研究银川市宾馆集中空调、热水系统军团菌污染现状及相关人群感染水平。方法 调查采集20家宾馆集中空调冷却水、冷凝水、洗澡热水的水样以及客房进出通风口过滤网上样品，进行军团菌培养和鉴定;选取暴露人群178人和对照人群192人采集血样，用酶联免疫法定性和(或)定量测定人体抗体。结果 采集冷却水20份，检出军团菌阳性5份;采集洗澡热水20份，检出军团菌阳性3份。检测暴露人群178人，6人血清抗体阳性;对照人群抽检192人，3人军团菌血清抗体阳性。结论 银川市宾馆集中空调冷却水、洗澡热水存在军团菌的污染，人群已受到感染，必须引起重视，防止军团菌病发生。
【关键词】 集中空调;军团菌;银川;人群感染
军团菌是引起军团菌病的一种急性呼吸道传染病的病原体，与人类关系最为密切的是嗜肺军团菌，由它引起的肺炎，如未及时治疗，病死率很高。自1979年美国疾病预防控制中心命名军团菌以来，全球对军团菌的致病性研究已有30年。国内外对军团菌的研究证实军团菌病的流行及传播与集中空调、热水设备等现代生活设备的供水环境密切相关。近年来，我国上海、北京、广州[1-3]等地陆续报道在集中空调系统的冷却塔水中检出军团菌，检出率达30%～84%。但在我国西北地区集中空调军团菌污染及相关人群感染水平的研究还未见报道。为此，我们对银川市宾馆集中空调、热水系统军团菌污染及相关人群感染水平进行了调查研究，为预防呼吸道传染病，控制军团菌污染和强化卫生管理提供依据。
1 材料和方法
1.1 现场采样
1.1.1 采样对象 (1)本市所有宾馆、饭店使用1年以上的集中空调系统;(2)在集中空调系统检出军团菌的宾馆工作2年以上的工作人员为暴露人群，无集中空调系统宾馆的从业人员为对照人群;(3)采样时间选择在2008年7月24日 -8月26日。
1.1.2 采样份数 (1)采集20家宾馆冷却水20份，冷凝水17份，客房进出口过滤网涂抹取样19份，洗澡热水20份;(2)采集工作2年以上暴露人群静脉血样178人份，对照人群192人份。
1.1.3 采样方法 (1)冷却水 用消毒采样瓶在冷却塔内水下10cm处取样500mL;(2)冷凝水 用消毒采样瓶在客房冷凝水集中排放管道口处取样500mL;(3)空调送风末端涂抹样 对客房进、回风口滤网用棉试子擦拭后，置于10mL蒸馏水试管中;(4)洗澡热水 用消毒采样瓶在客房浴室采集洗浴热水500mL。除冷凝水外，其余水样瓶中均加入0.1mL硫代硫酸钠脱氯;(5)随机采集暴露人群和对照人群静脉血3～5mL。
1.2 实验室检验项目
1.2.1 依据《卫生部公共场所集中空调通风系统卫生规范》[4]附录A检测冷却塔水、冷凝水、洗澡热水的军团菌。
1.2.2 过滤网涂抹样军团菌检验 保存过滤网棉拭子的生理盐水经震荡后取上层液体1mL与等量ph3.0的0.01mol/L的盐酸混合，静置10min作酸处理，培养与鉴定同前冷却水军团菌检验方法。
1.2.3 人血清军团菌抗体水平检测 购置德国赛润ELISAclassic嗜肺军团菌IgG/IgM试剂盒，采用ELISA测定人血清中抗嗜肺军团菌1-7的抗体水平。阳性判断标准：取阳性对照平均OD值后，从评估表中找到阳性对照值所属区间，从而找到阳性指标和阴性OD值判定范围。小于阴性指标OD值为阴性，大于阳性指标OD值为阳性。
1.3 统计学方法 所有资料采用SPSS 11.0统计软件进行数据处理和分析;采用χ2检验进行统计学分析。
2 结果
2.1 军团菌检出情况
采集冷却塔冷却水20份，5份样中检出军团菌;洗澡热水检测20份，3份检出军团菌;在冷凝水和过滤网涂抹样中均未检出军团菌。具体情况见表1、2。
2.1.1 冷却塔冷却水军团菌菌种检出情况 冷却塔冷却水5份水样检出军团菌，检出率为25%。其中，热处理检出其它型军团菌1株，酸处理检出嗜肺军团菌1型2株、嗜肺军团菌2-5型2株、其它型军团菌1株。
2.1.2 洗澡热水军团菌检出情况 共采集20家宾馆客房浴室洗澡热水20份，3份检出军团菌，检出率为15%。其中，热处理检出嗜肺军团菌2-5型2株，酸处理检出嗜肺军团菌2-5型2株。具体情况见表1、2。
2.1.3 冷凝水、过滤网样品军团菌检出情况 共采集17家宾馆冷凝水17份，19家宾馆进出口过滤网涂抹样19份，均未检出军团菌。具体情况见表2。表1 2008年银川市宾馆各种样品军团菌检出情况
2.2 暴露人群与对照人群军团菌血清学检测情况
暴露人群与对照人群性别、年龄构成差异无统计学意义，具有可比性。暴露人群血清抗体阳性率(3.37%)与对照人群阳性率(1.56%)之间差异无统计学意义(χ2=0.625，P&>0.05 )，见表5。表3 暴露人群与对照人群军团菌血清学检测结果比较
3 讨论
目前，国内外对军团菌人工水环境污染状况的监测重点放在空调冷却塔水和淋浴设施[7]，以及其所产生的含有军团菌的气溶胶。本次研究显示，冷却塔中冷却水和洗澡热水均受到军团菌的污染，与国内外报道相符，应引起关注。
本次研究结果显示， 冷却水阳性检出率为25%，与国内有关文献报道[5]相比偏低。可能与银川地处西北黄土高原，夏季高温天气时间短，集中空调使用周期短有关。此外，一般认为军团菌最适合生长温度为36～42℃，水温下降至20℃以下时处于休眠状态，郭常义等认为当气温下降至20℃以下5d后空调机不使用时，冷却塔水中军团菌处于失活状态[8]。本次调查20家宾馆冷却塔水温在16～34℃之间，平均水温23.7℃，20℃以上水样18份，30℃以上水样只有2份;另外，20家宾馆冷却塔每年清洗1～2次，个别的还进行消毒处理;这可能是造成冷却水中军团菌阳性率低、冷凝水未检出军团菌的主要原因。5份冷却水分离嗜肺军团菌1型2株、嗜肺军团菌2-5型2株、其它型军团菌2株。1型是引起军团病的主要病原体，一旦冷却塔中1型菌达到一定浓度时，很可能引起人群感染军团菌病甚至暴发性感染[6]。银川市宾馆集中空调污染状况存在潜在危险。
上海陈悦等对部分空调系统中过滤网检测发现，集中空调过滤网中军团菌有2%的检出率[9]。本次所采集的19份空调送、回风末端滤网均未检出军团菌，可能与军团菌本身喜水好热的特性决定了过滤网的低检出率，也与此次调查样本量小、选择点范围窄有关。
北京、湖北、南京及上海等地区调查发现健康人群军团菌抗体阳性率在5%～35%之间[10-12]。本次研究显示，暴露人群军团菌抗体阳性率(3.37%)与对照人群军团菌抗体阳性率(1.56%)差异无统计学意义(χ2=0.625，P&>0.05)，并且军团菌抗体阳性率均低于我国其他省市研究结果，其主要原因可能与本地气候条件及此次采集样本量小有关。
综上所述，银川市宾馆集中空调冷却水、洗澡热水存在军团菌的污染，人群已受到感染，必须引起重视，防止军团菌病发生。建议卫生监督部门应加强监管力度，规范集中空调系统清洗消毒的部位、方法和次数，进一步提高宾馆的管理水平。
参考文献
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