宁夏枸杞抗小鼠脂肪肝作用的实验研究

　　　　 作者：李国莉 杨建军 赵伟明 刘贺荣 任彬彬 马洁 张海东 史徐亮

【摘要】 目的 观察宁夏枸杞抗小鼠脂肪肝的作用。方法 成年雄性昆明种小鼠45只，随机分为三组，空白对照组喂饲基础饲料;枸杞组喂饲高脂饲料+枸杞(100g/kg);脂肪肝模型组喂饲高脂饲料，喂饲6周，将小鼠处死后，取肝脏冰浴下制备10%的肝组织匀浆，测定甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)、丙二醛(MDA)、组织蛋白，并取肝组织进行病理切片检查。结果 脂肪肝模型组小鼠的MDA、TC、TG含量明显高于空白对照组(P&<0.01);枸杞组小鼠肝脏TG、TC、MDA的含量明显低于脂肪肝模型组(P&<0.01);脂肪肝模型组肝脏脂肪变性较为严重、并伴有炎细胞浸润及坏死;枸杞干预组肝脏脂肪变性较轻，无明显炎细胞浸润及坏死。结论 宁夏枸杞具有明显的抗小鼠脂肪肝作用。

【关键词】 宁夏枸杞;脂肪肝;小鼠

随着我国经济的发展，膳食结构的改变，脂肪肝发病率呈逐年上升的趋势[1]，脂肪肝的发生与高脂血症有关，临床上常用降脂药治疗脂肪肝，但许多降脂药会加重肝损伤[2]。因此，寻找天然的抗脂肪肝物质，具有重要的意义。宁夏枸杞(Lycium barbarrum，LB)富含多种营养素和生物活性物质，具有抗氧化、降血脂及免疫调节等作用，目前国内尚未见到宁夏枸杞对脂肪肝的干预研究报道，本研究以非酒精性脂肪肝小鼠为动物模型，观察宁夏枸杞的干预作用。

　　1 材料与方法

　　1.1 材料

　　1.1.1 枸杞 宁夏中宁枸杞，购自银川市胜利街超市。

　　1.1.2 高脂饲料配方(%) 基础饲料88，猪油10，胆固醇1.5，猪胆盐0.5。

　　1.1.3 基础饲料(%) 面粉25，玉米面30，麸皮15，鱼粉8，骨粉2，奶粉2，豆粕10，盐 0.5，鱼肝油1，鸡蛋5，维生素及无机盐2。

　　1.1.4 实验动物 成年雄性昆明种小鼠，体重18～22g，由宁夏医科大学实验动物中心提供。

　　1.2 实验方法

　　成年雄性昆明种小鼠45只，适应性饲养3d后，随机分为3组：空白对照组喂饲基础饲料;枸杞干预组喂饲高脂饲料+枸杞(100g/kg);脂肪肝模型组喂饲高脂饲料，喂饲6周将小鼠脱颈椎处死后，取肝脏冰浴下制备10%的肝组织匀浆备用。每组随机抽取6只小鼠，取肝右叶，10%甲醛固定，常规制作石蜡切片，进行HE染色。

　　1.3 测定指标及方法 甘油三酯(TG)- TG酶法、胆固醇(TC)- CHO酶法、丙二醛(MDA)-硫代巴比妥酸比色法、组织蛋白-考马斯亮蓝法。采用试剂盒测定(由南京建成生物工程研究所提供)。

　　1.4 统计学方法

　　采用SPSS 11.5软件进行分析，结果以(±s)表示，采用方差分析。

　　2 结果

　　2.1 枸杞对小鼠脂肪肝组织学改变的影响

　　空白对照组：肝细胞呈多边形，核圆、居中，胞浆丰富、嗜酸，无明显变性、坏死。小叶结构清晰，汇管区未见炎细胞浸润。脂肪肝模型组：肝细胞明显肿胀，灶性坏死，肝组织内可见弥漫分布的大脂滴和微脂滴，并散布全肝。汇管区血管扩张充血，散在及灶性炎细胞浸润。枸杞组：肝细胞脂肪变性较轻，肝板排列完好，肝组织内见散在的大脂滴和微脂滴散布全肝。汇管区血管扩张充血，无明显炎细胞浸润及坏死(图1，见封2)。

　　2.2 枸杞对脂肪肝小鼠体重的影响

　　各组小鼠体重差异无统计学意义，P&>0.05。表1 小鼠体重变由表2可知，脂肪肝模型组小鼠肝脏中TG、TC、MDA含量高于空白对照组(P&<0.01)，枸杞组小鼠肝脏TG、TC、MDA含量低于脂肪肝模型组(P&<0.01)。

　　3 讨论

　　目前研究认为，非酒精性脂肪肝进一步发展会演变为脂肪性肝炎、肝硬化，甚至肝癌，对人类健康造成严重危害，因此，建立与人类非酒精性脂肪肝发病相近的动物模型尤为重要。本研究模拟人类摄食方式，采用高脂饲料造模，成功地建立了小鼠非酒精性脂肪肝动物模型。

　　本研究显示，枸杞组肝组织中TG、TC均低于脂肪肝模型组，表明宁夏枸杞可调节脂肪代谢，减少脂质在肝内的沉积，阻止高脂饲料诱导的小鼠脂肪肝的形成。同时肝组织病理结果显示枸杞组肝脂肪变性程度较模型组明显减轻，表明宁夏枸杞具有抗脂肪肝作用。

　　MDA是脂质过氧化物分解的终末产物，可损伤组织细胞的膜性结构，影响膜的功能，从而导致组织细胞功能的损伤。MDA在组织中的含量可直接反映机体脂质过氧化的速率和强度。因此，MDA含量的升高可以间接反应肝细胞脂质过氧化损害的程度。本文结果显示，宁夏枸杞可明显降低小鼠肝组织MDA含量，说明宁夏枸杞具有清除脂质过氧化产物MDA形成的作用，提高高脂饲料诱导的小鼠脂肪肝肝内抗氧化能力，降低其脂质过氧化水平。这可能是由于枸杞富含黄酮类、胡萝卜素、维生素E及硒等抗氧化活性成分[4]，故可有效地清除自由基，阻止高脂饮食诱发的脂质过氧化损伤。

　　综上所述，宁夏枸杞可明显降低小鼠肝组织中TG、TC、MDA含量，明显减轻肝脏脂肪变性，表明宁夏枸杞具有抗脂肪肝作用，其机制有待于进一步研究。

参考文献