大鼠心气虚模型制备方法

　　　　　　 作者：唐烨霞 程志清 姚立 吴玉芙 龚文波

【摘要】 目的：研究制备大鼠心气虚动物模型的方法。方法：成年近交系Wistar大鼠26只，雌雄各半，随机分为对照组和游泳模型组；游泳组每天采用两次游泳法，强迫大鼠负重游泳至力竭，实验第18天起，在每日游泳的基础上灌服心得安溶液2.4mg/100g，连续4天；实验第22天造模结束。结果：游泳组在造模第3天后体重逐渐减轻，至实验第21天较对照组体重明显降低(P&<0.01)，最大心室内压、心室峰压平均值、心率均下降，与对照组比较差异有统计学意义(P&<0.05或P&<0.01)。结论：游泳组大鼠体力下降，心功能减弱，符合临床心气虚的特点，心气虚大鼠模型制备成功。

【关键词】 大鼠；心气虚；动物模型

　　Abstract Objective:To reseach the method for preparing rat model of deficiency of heart-energy. Methods: 26 adult inbreeding line Wistar rats were randomly pided into the control group and the model group (males and females on halves). Every animal in the model group was forced to swim with slimming within 22 days. From 18th day propanolol was given， for 4 days. On the 21st day haemodynamics was measured in the model group and the control group. Results: The rats' weight in the swimming model group started to decrease from the 3rd day after model-preparing and there was a loss of weight on the 21st day. Such indexes in the experiment group as intraventricular pressure max， +dp/Pdtmax mean， HR were significantly lower than those in the control group(P ＜0.05 ). Conclusion: Rats' physical strength in the model group decline and their heart function gets weakened， which is consistent with the features of clinical deficiency of heart-energy. It is a success to prepare deficiency of heart-energy with rat.

　　Key words Wistar Rat;Deficiency of heart-energy；Animal model

　　目前，心血管病发病率、病死率居国内第一、二位，如何提高其疗效已成为医学界共同关注的问题。在心血管病系统中，心气虚证为常见证型[1]。因此，对心气虚证研究是中医防治心血管疾病的关键。动物实验要得到不含其它兼证的心气虚证很困难[2]，但由于实验动物可控性强，周期短，病理表现易于再现，重复损伤不存在医德伦理，所以成为心血管病实验研究首选对象。我们采用控食、强迫负重游泳和大剂量灌服心得安等多因素造模，以期制备较理想的心气虚证动物模型。

1 材料与方法

　　1.1 实验材料 近交系Wistar大鼠(中国科学院上海实验动物中心）26只，体重180～200g，雌雄各半，随机分为对照组（14只）和游泳模型组（12只）；游泳缸（直径30cm、高50cm）；MedLab生物信息采集处理系统（南京美易生物科技有限公司）；0.48%心得安溶液。

　　1.2 方法

　　1.2.1 造模方法 (1)游泳组：造模全过程按大鼠静息状态下采食量进食，即喂饲精饲料5g/100g。每天强迫负重（按大鼠自身重量5%计）游泳至力竭（水温25～28℃，以头没入水下10秒不能上浮为力竭标准），力竭采用两次游泳法，前后相隔10分钟。实验第18天起，在每日游泳的基础上灌服心得安溶液2.4mg/100g，连续4天。实验第22天造模结束，进行指标测定。(2)对照组：实验过程自由进食。实验第18天起，每日灌服生理盐水0.5mL/100g体重，连续4天。于实验第22天测定相关指标。心气虚证按中国西医结合">中西医结合学会心血管学会1990年修订的标准[3]判断。

　　1.2.2 心功能检测方法 戊巴比妥钠麻醉动物后，分离右侧颈总动脉，插入含0.1%肝素生理盐水的细塑料管直至左心室，并联接于MedLab生物信息采集处理系统，记录左室血流动力学的指标。

　　1.2.3 统计方法 计量资料数据均用均数±标准差（x±s）表示，以P＜0.05为差异有统计学意义。

　　2 结果

　　2.1 一般情况 游泳组大鼠实验的前7天觅食活动增强，频咬铁笼。7天后逐渐安静，14天后出现精神不振、活动减少、毛松、眼眶变小、鼠尾颜色淡白、拱肩缩背、行动迟缓。实验第18天起连续灌服心得安4天后，出现精神萎靡、倦怠，尤以强迫活动后为甚。对照组大鼠活动正常。

　　2.2 体重变化 造模前游泳组与对照组比较差异无统计学意义（P&>0.05）。造模第3天后体重逐渐减轻，至实验第21天游泳组较对照组体重明显降低(P&<0.01)，见图1。

　　图1 两组大鼠体重变化2.3 心脏功能检测结果 游泳组的最大心室内压、心室峰压平均值、心率均下降，与对照组比较差异有统计学意义(P&<0.05或P&<0.01)，说明心脏的收缩功能受到了明显影响。见表1。表1 Wistar大鼠心脏功能检测结果

　　3 讨论

　　根据《素问·刺志》“谷盛气盛，谷虚气虚”和《灵枢·五味篇》“谷不入半日则气衰，一日则气少矣”，实验中每日给予大鼠的基础进食量，只保证大鼠的每日基础需要量，同时增加消耗量以达到饥则损气和劳则耗气的目的。实验中，游泳组大鼠出现精神萎靡、少动、皮毛蓬松、无光泽、鼻尾色淡、缩肩拱背等现象，且体重明显下降，尤以强迫活动后为甚；实验结束时游泳组大鼠心脏收缩功能明显下降。上述结果提示游泳组大鼠体力下降，心功能减弱，符合临床心气虚的特点，说明心气虚大鼠模型制备成功。心得安具有抑制Ca2+和 Na+的内流作用，及抑制交感神经对心脏的刺激效应和兴奋迷走神经作用从而对心脏及传导系统具有负性效应。同时心得安为非选择性β受体阻断剂，长期或大剂量使用使支气管阻力增高，从而引起缺氧和二氧化碳潴留，影响心肌血供。因此，我们在大鼠力竭运动后使用大剂量心得安，一方面是将气虚定位于心，另一方面也是用来耗损心气，旨在加重心肌损伤，以保证造模成功。

参考文献