关于从梳子上提取DNA检验1例

【关键词】 DNA 亲子鉴定 STR分型
1材料和方法
一老年妇女于200708携带一把梳子（为其儿子生前一人所用），要求对梳子上所留DNA和其孙女的DNA进行父女亲权鉴定. 采集梳子上脱落细胞DNA的方法：将小块纱布用双蒸水浸湿，擦拭梳齿数根，将擦拭物置于1.5 mL Eppendorf管中，室温下用去离子水浸泡4 h，振荡洗涤，12 000 g离心10 min，收集沉渣，如此反复3次以充分获取梳子上的人体脱落细胞. 然后在沉渣中加入50 g/L CheleX100 50 μL和10 g/L蛋白酶K 5 μL，用加样枪头混匀(不要震荡混匀，以免收集的沉渣黏附在液面以上的管壁上)，置56℃ 1 h，混匀后100℃放置8 min，12 000 g离心5 min，上清4℃保存备用. 取上清1 μL，使用AmpFLSTR Identifiler PCR Amplification Kit (ABI公司)试剂盒进行扩增，扩增反应为10 μL体系. ABI310型遗传分析仪检测扩增产物，GeneMapper ID v3.2软件进行分型. 检测位点为D8S1179，D21S11，D 7S820，CSF1PO，D3S1358，THO1，D13S317，D16S539，D2S1338，D19S433，VWA，TPOX，D18S51，D5S818，FGA和性别位点Amelogenin共16个位点.
　　2结果
梳子上提取的DNA共16个位点全部检测出，并与其孙女的DNA进行比对，发现梳子的使用者（老人的儿子）与其孙女的16个STR位点完全匹配，可认定他们是亲生父女.
　　3讨论
在PCRSTR分型技术中，血痕、口腔拭子、毛发等生物学检材已被广泛使用. 但在某些特殊情况下，这些检材并不能容易得到，如被检者死亡、失踪或者不愿配合检测等，这时需关注一些易被忽略的微量检材，如本鉴定中的梳子、牙刷［1］、 手机等，这些检材的成功分型为亲子鉴定提供了更为广泛的证据来源［2］. 本鉴定实践证明，对死者生前所用的梳子提取DNA，虽然较微量，但还是可以成功提取并检测到人体DNA，16个STR位点分型清晰. 将死者生前所用的梳子上所留DNA与其女血样DNA进行亲子鉴定，亲权概率达99．99％. 在亲子鉴定中，被检测者所用的离体检材的DNA往往量微质差，所以在提取DNA时加入CheleX100的量要比常规检材少，以免稀释所提DNA. 同时，擦拭检材的载体不能太大. 梳子DNA的检验受到很多因素的影响. 如个体梳头的习惯、力度等都会导致遗留在梳子上的DNA量有个体差异. 若梳子被多人使用，检测将会受到干扰，影响结果的判定. 另外，梳子存放时间越长，DNA会部分降解导致提取量的减少，所以对离体检材应该在尽短的时间内予以检测.
【参考文献】
［1］ 王欣，徐振波，徐丽莹. 从牙刷提取DNA检验1例［J］. 法医学杂志， 2006， 22（12）：4.

［2］ Bright JA， Petricevic SF. Recovery of trace DNA and its application to DNA profiling of shoe insoles ［J］. Forensic Sci Int， 2004， 145(1): 7.转贴于