毛细管色谱法测定丙卡特罗中有机溶剂残留量

【摘要】 目的:建立毛细管气相色谱法测定丙卡特罗中的有机溶剂残留量。方法:用Agilent INNOWax毛细管气相色谱柱、FID检测器，以乙腈为内标进行测定。结果:正己烷、乙酸乙酯、吡啶的线性范围分别为0～464 μg/mL(r=0.999 9)、0～800 μg/mL(r=0.999 8)、0～32 μg/mL(r=0.999 3)，平均回收率分别为99.8 %、100.5 %、101.3 %，RSD分别为0.96 %、1.38 %、2.18 %(n=9)。结论：毛细管气相色谱法简单、准确、灵敏度高、重现性好，适用于丙卡特罗中有机溶剂残留量的测定。

【关键词】 丙卡特罗;毛细管气相色谱法;有机溶剂残留量

　　Abstract Objective: To develop gas chromatography method for determination of the residual organic solvents in procaterol. Methods: The samples were injected into Agilent INNOWax capillary column. and analysed with FID detector using acetonitrile as the internal standard. Results: The linear ranges of hexane， ethyl acetate and pyridine were 0～464 μg/mL(r=0.999 9)，0～800 μg/mL(r=0.999 8)and 0～32 μg/mL(r=0.999 3)， respectively. The recoveries were 99.8 %，100.5 %，and 101.3 % with RSD 0.96 %，1.38 %，and 2.18 %(n=9)， respectively. Conclusion: The method is simple， accurate and sensitive with good reproducibility. It can be used for determination of the residual organic solvents in procaterol.

　　Key words Procaterol; Capillary gas chromatography; Residual organic solvents

　　丙卡特罗(procaterol)是第3代新的拟交感β2受体药物，对气管平滑肌的β2受体有较高的选择性，而对心脏的兴奋性较弱。给药剂量仅为几十微克，就可以产生较强作用，且持续时间长，是用于治疗支气管哮喘、喘息性支气管炎及慢性阻塞性肺部疾病的新药[1]。该药物在合成过程中采用了正己烷、乙酸乙酯、吡啶等有机溶剂，故对此三种有机溶剂加以检测有利于药物质量控制。本实验采用毛细管色谱法测定丙卡特罗原料药中有机溶剂的含量，方法简便，结果准确可靠。

　　1 仪器与试剂

　　Agilent 6890增强型气相色谱仪，Agilent 6890工作站。正己烷、乙酸乙酯、吡啶均为分析纯(上海化学试剂公司)，乙腈(内标物)为色谱试剂(天津化学试剂一厂)，二甲基亚砜为光谱纯(本溪市轻化工研究所实验厂)。

　　2 方法与结果

　　2.1 色谱条件 色谱柱：Agilent HP-INNOWax〔固定液为聚乙二醇(PEG)，30 m×0.32 mm，df=0.25 μm〕毛细管柱;气化室温度：200 ℃;程序升温：起始温度为50 ℃，保持5 min，然后以10 ℃/min升温至100 ℃，保持5 min，然后以40 ℃/min升温至220 ℃，保持3 min;载气为氦气;分流比：5∶1;进样量1 μL;检测器温度：氢焰离子化检测器(FID)，220 ℃。

　　2.2 溶液及试样制备

　　2.2.1 内标溶液的制备 精密量取色谱试剂乙腈127.8 μL(约相当于100 mg)，置100 mL量瓶中，用二甲基亚砜稀释至刻度，摇匀，作为内标溶液。

　　2.2.2 对照溶液的制备 精密量取正己烷880.1 μL(约相当于580 mg)，吡啶40.7 μL(约相当于40 mg)，置100 mL量瓶中，用二甲基亚砜稀释至刻度，摇匀，作为对照贮备液A;精密量取乙酸乙酯555.1 μL(约相当于500 mg)，置50 mL量瓶中，用二甲基亚砜稀释至刻度，摇匀，作为对照贮备液B。精密量取对照贮备液A 10 mL、对照贮备液B 10 mL，置同一100 mL量瓶中，用二甲基亚砜稀释至刻度，摇匀，作为对照贮备液。精密量取对照贮备液5 mL，置10 mL量瓶中，精密加入内标溶液1 mL，加二甲基亚砜稀释至刻度，摇匀，即得对照溶液。

　　2.2.3 供试品溶液的配制 取丙卡特罗原料约1 g，精密称定，置10 mL量瓶中，精密加入内标溶液1 mL，加二甲基亚砜适量，振摇使溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。

　　2.3 系统适用性试验 精密量取对照品溶液1 μL，注入气相色谱仪，记录色谱图，测定各有机溶剂的分离度及柱效。结果表明，以上各有机溶剂计算的理论塔板数均达到5 000以上，相邻溶剂的分离度均符合要求。对照品溶液GC色谱图见图1，样品GC色谱图见图2，空白溶液(二甲基亚砜)GC色谱图见图3。

　　2.4 线性关系 精密量取对照贮备液0.5、1.0、2.0、4.0、5.0、6.0和8.0 mL分别置10 mL量瓶中，各精密加入内标溶液1 mL，加二甲基亚砜稀释至刻度，摇匀。分别精密量取上述各浓度溶液1 μL，注入气相色谱仪，测定。分别以正己烷、乙酸乙酯、吡啶对照液的峰面积与乙腈(内标)峰面积的比值为纵坐标(Y)，以正己烷、乙酸乙酯、吡啶的浓度为横坐标(X)，进行线性回归。结果见表1。表1 线性范围及回归方程以上结果表明，正己烷、乙酸乙酯、吡啶在相应的线性范围内线性关系良好。

　　2.5 回收率试验 分别取本品约1.0 g，精密称定，置10 mL量瓶中(共10份)，精密加入对照贮备液4 mL(3份)、5 mL(3份)、6mL(3份)，另取1份不加贮备液，作为空白，再精密加入内标溶液1 mL，加二甲基亚砜稀释至刻度，摇匀(共10份)。分别精密量取上述各浓度溶液1 μL，注入气相色谱仪，记录峰面积，计算回收率。结果见表2。2 回收率实验结果(n=9)

　　2.6 精密度试验 精密量取对照溶液1 μL，按上述测定法操作，重复进样6次，结果见表3。表3 精密度试验结果

　　2.7 最低检出限的测定 取对照品溶液逐步稀释进样，测得正己烷、乙酸乙酯、吡啶的最低检出限分别为1.16、1.00、0.40 μg/mL。

　　2.8 样品测定 按2.2.3项制备供试品试样，按2.2.2项制备对照品试样，分别测定有机溶剂残留量，记录色谱图，按内标法以峰面积计算各溶剂含量，结果见表4。表4 丙卡特罗中有机溶剂残留量测定结果

　　3 讨论

　　气相色谱法具有分析速度快、分离良好、灵敏度高的优点，因此，广泛应用于痕量物质的分析。本文采用气相色谱法对丙卡特罗中有机溶剂残留量进行测定，分离速度快，定量准确，且重现性好。采用内标法测定有机溶剂的含量，可以减少仪器误差及实验者的操作误差。通过实验筛选发现用乙腈作为内标物，可以和这3种有机溶剂达到有效分离，且无干扰，经方法学验证得到满意的结果，精密度符合中国药典的要求[2](相对标准偏差&<5 %)，柱温起始温度为50 ℃保证了3种有机溶剂的分离良好，利用程序升温，使溶剂峰快速出峰，缩短分析时间，提高了工作效率。

参考文献