作者：董晓薇， 方新民， 姜怡邓， 董泉洲
【摘要】 目的 研究枸杞油对哈白兔抗氧化功能的影响。方法 分别以高胆固醇饲料加用生理盐水、脂比妥，低、高剂量枸杞油饲养哈白兔，在15、25、35、45、56d时股动脉采血，检测血清中SOD、GSH-Px、T-AOC、MDA含量。结果 56d后，高脂模型组血清SOD、GSH-Px、T-AOC明显低于各组，而MDA明显高于各组;正常对照组、阳性对照组、低剂量组之间，SOD、GSH-Px、T-AOC、MDA差异无统计学意义;高剂量组血清内SOD、GSH-Px、T-AOC明显高于各组，而MDA明显低于各组。结论 枸杞油能够提高机体抗氧化能力，降低体内脂质过氧化作用。
【关键词】 枸杞油;抗氧化;氧自由基
宁夏枸杞系回医传统用药，在《回回药方》中称之为忽咱则。枸杞油以枸杞籽为原料制备而成。现代医学研究证实枸杞油能增加机体抗缺氧能力，增强耐力，有抗疲劳作用[1];明显降低血清总胆固醇(total cholesterol，TC)、甘油三酯(triglyeride，TG)、低密度脂蛋白(low density lipoprotein，LDL)水平，升高高密度脂蛋白(high density lipoprotein，HDL)水平[2]。本文进一步探讨枸杞油对机体抗氧化功能的影响。
1 材料和方法
1.1 材料 健康哈白兔30只，体重1.5～2.0kg，雌、雄各半，由宁夏医科大学实验动物中心提供。枸杞油由宁夏志诚生物食品工程有限公司提供(批号：20070822);超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、总抗氧化酶(T-AOC)测试盒，均为南京建成生物工程研究所生产。高胆固醇饲料配方组成：其中正常饲料72.25%，猪油10%，胆固醇0.25%，蛋黄粉7.5%，白糖10%。721分光光度计、sartorius电子分析天平、TGL-16B高速离心机。
1.2 实验方法
1.2.1 枸杞油剂量选择 参照枸杞油人的口服剂量与《人和动物间按体表面积折算的等效剂量比率表》计算。
1.2.2 实验动物分组 哈白兔经饲养基础饲料1周后，随机分成5组，每组6只。①正常对照组常规饲养，经口灌胃生理盐水0.9g·kg-1·d-1;②高脂模型组、阳性对照组、枸杞油低剂量组、枸杞油高剂量组均喂饲高脂高胆固醇饲料，分别经口灌胃生理盐水900mg·kg-1·d-1、脂必妥1mL·kg-1·d-1(120mg)、枸杞油900mg·kg-1·d-1、枸杞油1800mg·kg-1·d-1。
1.2.3 指标测定 血清过氧化指标测定：动物以基础饲料适应性喂养1周后，股动脉采血5mL抗凝、离心、分离血清，分别测定基础血清SOD、GSH-Px、T-AOC、 MDA含量。实验过程中分别在15、25、35、45、56d自股动脉采血，按试剂盒说明测定以上指标。
1.3 统计学方法 采用SPSS 11.5统计软件进行处理，结果用(±s)表示，组间比较采用单因素方差分析，α=0.05。
2 结果
2.1 血清过氧化指标值的比较
2.1.1 基础血清过氧化指标比较 哈白兔基础血清SOD、GSH-Px、T-AOC、 MDA含量各组间差异均无统计学意义，P&>0.05，见表1。
2.1.2 各组56d后血浆过氧化指标的比较 见表2。56d后高脂模型组兔血清SOD、GsH-Px、T-AOC活性明显低于各组(P&<0.01)，而MDA含量明显高于各组(P&<0.05);正常对照组、阳性对照组、枸杞油低剂量组之间SOD、GsH-Px、T-AOC、 MDA含量差异无统计学意义(P&>0.05);枸杞油高剂量组血清SOD、GsH-Px、T-AOC活性明显高于各组(P&<0.05)，而血清MDA含量与正常对照组、阳性对照组、枸杞油低剂组差异无统计学意义(P&>0.05)。表1 哈白兔基础血清过氧化指标测定值*枸杞油低剂量组226.50±7.58*△987.57±34.88*△11.24±0.93*△9.06±5.14*枸杞油高剂量组259.20±5.56*1108.36±40.69*13.54±0.89*8.04±5.36* 与高脂模型组比较*P&<0.05，与枸杞油高剂量组比较△P&<0.05
2.2 各组兔血浆SOD、GsH-Px、T-AOC、MDA变化曲线 见图1～4。
在实验过程中，正常饲料组、阳性对照组、枸杞油低剂量组血清SOD、GsH-Px、T-AOC、 MDA指标值基本保持不变，高脂模型组血浆SOD、GSH-Px、T-AOC同步下降，而MDA含量上升;枸杞油高剂量组血清SOD、GsH-Px、T-AOC同步上升，而MDA含量下降
3 讨论
机体代谢过程中，氧化还原反应产生的自由基，特别是超氧阴离子自由基，攻击生物膜磷脂中不饱和脂肪酸双键而导致脂质过氧化反应，激起自由基的连锁反应，形成一系列的脂质自由基及其降解产物丙二醛，过多的脂质过氧化产物可以与细胞内许多生物大分子，诸如蛋白质、核酸发生交联，使蛋白质变性，酶失活，造成细胞内氧化磷酸化障碍。此外，MDA还可以增加膜的刚性，降低膜的流动性，使膜的通透性发生改变，造成膜的结构和功能受损[3]。因此，当机体氧化系统和抗氧化系统失衡时，产生的大量自由基，最终形成过多的过氧化产物，是导致机体疾病、衰老和死亡的主要原因[4]。所以，寻找天然食物中的抗氧化剂成为当前营养、药学领域的研究热点。
本研究选用以我国名贵药食两用植物，宁夏枸杞的籽为原料，采用超临界二氧化碳萃取法[5]，制备的枸杞油，以它为研究对象，观察其对机体内抗氧化防御系统以及脂质过氧化反应的影响。结果表明枸杞油能够提高机体的抗氧化能力，降低体内脂质过氧化作用。枸杞油具有上述功能，与其成分密切相关，它富含维生素E、β-胡萝卜素等多种抗氧化成分，它所含的黄酮类、酚类物质，能够提供活泼的质子，与自由基结合成稳定的产物，可阻断脂质的过氧化过程[6]。枸杞油提高机体抗氧化系统一些酶的活性，这可能与它富含较多的微量元素Se、Eu、Cu有关。Se是GsH-Px的辅助因子，Eu、Cu是SOD的辅助因子，因此这些微量元素在体内的含量状况是影响酶活性的重要因素之一。综上所述，作者认为枸杞油能够增强机体抗脂质过氧化作用是多种成分联合作用的结果。
本研究还观察到枸杞油的用量，对机体抗氧化功能有一定的影响。尽管枸杞油高剂量组与低剂量组、正常对照组之间兔血清MDA含量差异无统计学意义，但枸杞油高剂量组兔血清内SOD、GsH-Px、T-AOC活性和低剂量组、正常对照组之间差异有统计学意义。表明随着枸杞油用量增加，机体内抗氧化酶系统的能力增加，其原因尚待进一步探讨。
参考文献
[1] 姜怡邓，董晓薇，董泉洲，等.枸杞籽油对小鼠耐缺氧抗疲劳作用实验研究[J].宁夏医学院学报，2004，26(1)：19-21.
[2] 董晓薇，姜怡邓，董泉洲，等.枸杞油对机体脂质代谢的影响[J].宁夏医学杂志，2005，27(8)：518-520.
[3] 陈乃富，黄新华，季洪武，等.蕨菜黄酮对小鼠体内两二醛含量的影响[J].生物学杂志，2006，23(4)：30-33.
[4] 刘文，毛镇，陈龙，等.大豆对衰老小鼠脑组织抗氧化能力的影响[J].徐州师范大学学报，2004，22(4)：41-44.
[5] 潘太安，刘墩华，毛忠英.超临界萃取枸杞子油的研究[J].宁夏大学学报：自然科学版，2000，21(2)：156-158.
[6] 卫生部食品卫生监督所.保健食品功能学评价程序和检验方法[S].卫监发 1996.