作者：鱼云霞，张玉容，池淑红，王海英
【摘要】 目的评价抗核小体抗体(AnuA)对系统性红斑狼疮(SLE)诊断的敏感性和特异性。方法选取风湿免疫科住院患者及门诊健康体检者，用ELISA法检测血清AnuA水平，其中94例SLE患者、50例疾病对照组和30例正常对照组。结果SLE患者血清AnuA阳性率为78.7%，疾病对照组为8.0%，正常对照组全部为阴性; AnuA对SLE诊断的敏感性和特异性分别为78.7%、97.4%，其敏感性与抗ds-DNA抗体、抗Sm抗体比较差异有统计学意义(P&<0.01)，特异性差异无统计学意义(P&>0.05);与ANA比较，特异性有统计学意义 (P&<0.01)，敏感性无统计学意义(P&>0.05)。在抗dsDNA抗体、抗Sm抗体、ANA阴性的SLE患者中，AnuA阳性率分别为88.1%、91.4%、81.8%。结论AnuA在SLE患者血清中水平明显增高，AnuA测定在SLE诊断中有很高的特异性，特别是对抗ds-DNA抗体、抗Sm抗体、抗核抗体阴性的SLE的诊断有重要意义。
【关键词】 抗核小体抗体;系统性红斑狼疮;ELISA
[Abstract]ObjectiveTo evaluate the diagnostic specificity and sensitivity of antinucleosome antibodies (AnuA) in systemic lupus erythematosus (SLE).MethodsThe ELISA was used to measure the AnuA in serum of patients with systemic lupus erythematosus. 50 patients with other rheumatic diseases and 30 healthy controls were recruited to the study.ResultsSeropositive for AnuA were 78.7% in SLE patients and 8.0% in controls (P&<0.01). The sensitivity and specificity of AnuA in SLE were 78.7%and 97.4% respectively. The specificity of AnuA in SLE was higher than anti-histone antibody (ANA) (P&<0.01). The incidences of AnuA in SLE with negative anti-dsDNA，Sm and anti-histone antibody (ANA) were 88.1%，91.4%and 81.8%.ConclusionThe AnuA is specific antibody for diagnosis of SLE，and AnuA is valuable in diagnosis of SLE with negative anti-dsDNA，Sm and anti-histone antibodies.
[Key words]Anti-nucleosome antibody; Lupus erythematosus; ELISA
系统性红斑狼疮(SLE)早期诊断有一定局限性。近年研究提示[1]，抗核小体抗体(AnuA)对SLE诊断的敏感性高、特异性强，可能是SLE诊断的标记性抗体之一。本文采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定SLE患者、疾病对照组及正常人血清中的AnuA水平，探讨该抗体在SLE中的诊断价值。
1资料与方法
1.1一般资料：
选取2008年7月-2009年7月我院风湿免疫科住院患者及门诊健康体检者，用ELISA法检测94例SLE患者、50例疾病对照组和30例正常对照组血清中的AnuA。SLE 94例中女89例，男5例，年龄12-65岁，平均(35±13)岁;病程2个月-8年，平均(34±23)个月。SLE诊断均符合1997年美国风湿病学会修订的SLE分类诊断标准[2]。疾病对照组为其他风湿性疾病50例，女45例，男5例，年龄13-70岁，平均(36±15)岁;病程1个月-17年，平均病程(28±21)个月，其中包括类风湿关节炎18例(RA)、干燥综合征9例(SS)、多发性肌炎4例(PM)、皮肌炎5例(DM)、结缔组织病未分化型(UCTD) 2例、混合性结缔组织病(MCTD) 3例、硬皮病(SSc) 3例、白塞病(BS) 4例、血管炎2例。诊断均符合各自的国际诊断标准。正常对照组30例，选取我院健康体检者，女17例，男13例，年龄21-65岁，平均(32±11)岁。
1.2试剂材料：
AnuA检测试剂盒、抗核抗体(ANA) 试剂盒、抗Sm抗体试剂盒抗ds-DNA抗体试剂盒，均购自德国欧蒙公司。
1.3AnuA检测：
采用ELISA法，采取所有实验对象晨起空腹血清2 ml，向已包被核小体的微孔板中加入1∶100稀释的血清100μl室温孵育1h;冲洗3次后加入100μl抗人IgG室温孵育30 min，再冲洗3次后加入100μl底物显色剂，室温、避光孵育5-10 min;每孔加入100μl终止液，在30 min内505酶标仪以450 nm测A值并做标准曲线，求待测血清浓度，大于20RU/ml为阳性。
1.4其他抗体和指标检测：
放射免疫法测定抗ds-DNA抗体;间接免疫荧光法测定抗核抗体(ANA);免疫双扩散法测定抗Sm抗体;常规方法检测血常规、尿常规、血沉(ESR)、免疫球蛋白、补体(C3、C4)、肝肾功能。
1.5统计学方法：
采用SPSS 11.0统计软件包，采用χ2检验，以P&<0.05为差异有统计学意义。
2结果
2.1AnuA检测：
见表1。SLE组中的AnuA阳性率均高于其他两组，差异有统计学意义(χ2分别为65.75、89.87，P&<0.01)。AnuA对SLE诊断的敏感性和特异性分别为78.7%和97.4%。
2.2AnuA与其他自身抗体的关系：
见表1。抗ds-DNA抗体在SLE诊断中的敏感性为55.3%(52/94)，特异性为96.3%(52/54);抗Sm抗体在SLE诊断中的敏感性为25.5%(24/94)，特异性为96.0%(24/25);ANA抗体在SLE诊断中的敏感性为88.1%(83/94)，特异性为64.8%(83/128例)。表194例SLE患者中自身抗体的表达从SLE患者的几种自身抗体比较可以看出，AnuA的敏感性高于Sm抗体、抗ds-DNA抗体(χ2分别为53.28、11.64，P&<0.01)，和抗核抗体敏感性相比无统计学意义(χ2=3.13，P&>0.05);而对SLE诊断特异性比较，AnuA与Sm抗体、抗ds-DNA抗体比较差异无统计学意义(χ2分别为0.097、0.018，P&>0.05);与抗核抗体比较，差异有统计学意义(χ2为23.17，P&<0.01)。
2.3其他抗体阴性的SLE患者：
在抗ds-DNA阴性的SLE患者42例中AnuA阳性37例(88.1%)，Sm抗体阴性的SLE患者70例中AnuA阳性64例(91.4%)，ANA抗体阴性的SLE患者11例中AnuA阳性9例(81.8%)。AnuA在SLE的诊断中有重要的意义，特别是对ds-DNA阴性、Sm抗体、ANA抗体阴性的SLE患者更具有诊断意义。
3讨论
本组资料显示，AnuA在SLE中的阳性率为78.7%，略高于苏茵等[3]报道的69.9%。AnuA在SLE中特异性为97.4%，与国外报道[4]结果一致。所以ANuA被认为是最有希望广泛应用于系统性红斑狼疮诊断的一个新的特异性自身抗体。
本组资料显示，抗ds-DNA抗体在SLE诊断中的敏感性为55.3%，特异性96.3%;抗Sm抗体在SLE诊断中的敏感性为25.5%，特异性96.0%;而AnuA对SLE诊断的敏感性和特异性分别为78.7%、97.4%，其敏感性显著高于抗双链DNA和抗Sm抗体的敏感性(P&<0.01)，其特异性无统计学意义(P&>0.05);与ANA比较敏感性无统计学意义(P&>0.05)，但其特异性有统计学意义(P&<0.01)。故AnuA是一种可用于SLE诊断的新的特异性抗体，可作为SLE的标记抗体，具有较高的敏感性，提示AnuA对提高SLE的诊断具有一定临床价值。
有文献报道[5]，AnuA对抗双链DNA抗体、抗Sm抗体检测为阴性的SLE患者血清中也有较高的阳性率(可达86%和90%)。本研究说明AnuA在SLE的诊断中有重要的意义，特别是对抗ds-DNA阴性、抗Sm抗体、ANA抗体阴性的SLE患者更具有诊断意义。也说明AnuA在SLE的诊断中可以与其他抗体互补，提高SLE的诊断率，对SLE的早期和不典型病例具有诊断价值。
也有研究认为， AnuA的表达可能参与SLE的发病机制，且与SLE病情活动性、狼疮肾炎、神经精神症状显著相关[6]。关于AnuA与疾病病程及病情活动性的关系目前文献报道意见不一，大多数学者认为AnuA与SLE的疾病活动性密切相关。由于缺乏大样本的比较，抗核小体抗体与SLE病情活动和脏器损害的相关性尚需进一步研究。
参考文献
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