口腔扁平苔藓和冠心病患者血清中IFN γ和TNF α的表达及其有关分析

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　　　　　　　　　　 作者：李高中，徐琳，朱肖星，权正良，蔡乐农，苏联珍，李秀燕，种永峰

【摘要】 　　目的： 通过比较伴有口腔扁平苔藓的冠心病患者和口腔扁平苔藓患者血清中IFNγ和TNFα的含量，探讨口腔扁平苔藓和冠心病之间的关系. 方法： 选取30例经冠状动脉造影确诊并伴口腔扁平苔藓的冠心病患者、同样数量的口腔扁平苔藓患者及健康志愿者，采用双抗体夹心ABCELISA法检测IFNγ和TNFα的含量. 结果： 冠心病并发口腔扁平苔藓组和口腔扁平苔藓组血清中IFNγ和TNFα的含量分别高于健康对照组，并具有统计学差异(P&<0.01)，冠心病并发口腔扁平苔藓组与口腔扁平苔藓组之间IFNγ和TNFα的含量也存在显著性差异(P&<0.01). 结论： IFNγ和TNFα可能与冠心病和口腔扁平苔藓病理机制密切相关，口腔扁平苔藓和冠心病之间可能存在一定的关联.
【关键词】 口腔扁平苔藓；冠心病；IFNγ；TNFα
　　【Abstract】 AIM: To compare the concentrations of serum IFNγ and TNFα in patients with oral lichen planus(OLP) and coronary heart disease(CHD)， and to probe into the relationship of OLP and CHD. METHODS: Thirty CHD patients confirmed by coronary angiography developed OLP. Thirty OLP patients and 30 healthy volunteers were taken as control groups respectively. All the cases were tested for the serum concentrations of IFNγ and TNFα through ABCELISA technique. RESULTS: The serum levels of IFNγ and TNFα in CHD+OLP group and OLP group were significantly higher than those in normal control group (P&<0.01). The significant differences in serum levels of IFNγ and TNFα were detected between CHD+OLP group and OLP group (P&<0.01). CONCLUSION: IFNγ and TNFα may be significantly associated with the pathological mechanisms of OLP and CHD， but the relationship of both diseases still need to be further confirmed.
　　【Keywords】 oral lichen planus; coronary heart disease; interferonγ(IFNγ); tumor necrosis factor alpha(TNFα)
　　0 引言
　　新近有学者发现约40%冠心病（coronary heart disease， CHD）和脑血管病的患者处于一种慢性炎性免疫状态，在CHD患者的血液及受累的组织中存在炎性物质或免疫物质、自身抗体及参与自身免疫的特异细胞，认为自身免疫在CHD中可能发挥着重要作用［1］. 口腔扁平苔藓(oral lichen planus， OLP) 是一种常见的慢性口腔黏膜炎症性疾病，具有癌变潜能. 其病因和发病机制目前仍不明确，但大量证据证实免疫因素在该病的发生发展过程中占主要地位［2］. 干扰素γ（IFNγ）和肿瘤坏死因子α（TNFα）是参与免疫反应的最重要细胞因子之一. 本实验我们比较了不同疾病患者血清中IFNγ和TNFα的含量，分析OLP和CHD之间的关系.
　　1　对象和方法
　　1.1　对象
　　选取2005/2006在西安交通大学医院和广州军区总医院心内科住院CHD患者30（女20，男10）例，年龄（60.5±6.9）岁，以国际心脏病学会和协会及WHO《冠心病诊断标准》为指南，所有患者根据既往病史、临床诊断及心血管相关检查，经冠状动脉造影证实，诊断标准为冠状动脉前降支、旋支或右冠状动脉中至少有一支狭窄程度&>50%（直径法）. 30例OLP患者接受常规体检及口腔检查，OLP的诊断经病理学检查证实. 选取30例心电图大致正常者（ECG无缺血改变）且无OLP为健康对照组. 有下列疾病之一者如进展性肝脏疾病、肿瘤、肾功能衰竭、胶原性疾病、传染性疾病和其他部位严重感染等、3 mo内使用免疫调节剂等均被排除.
　　1.2　方法
　　1.2.1　标本收集
　　清晨空腹抽取所有入选者肘静脉血4 mL，3000 r/min离心5 min，分离收集血清于无菌试管中，密封遮光，-70℃保存待用.
　　1.2.2　细胞因子的检测
　　IFNγ和TNFα免疫试剂盒(法国Diaclone公司)，室温复融血清，采用双抗体夹心ABCELISA法，DG5032酶联反应分析仪(南京华东电子集团有限公司)在492 nm处测A值，以标准品在半对数表上绘制标准曲线，根据样品A值在该曲线图上查出相应的IFNγ和TNFα含量.
　　统计学处理： 所有实验结果以x±s表示，组间差异比较采用单因素方差分析及LSDt检验，应用SPSS 11.0统计软件进行分析.
　　2　结果
　　CHD组患者血清中的IFNγ和TNFα显著高于健康对照组(P&<0.01)，CHD+OLP组的IFNγ和TNFα也显著高于健康对照组和CHD组（P&<0.01，表1）. 表1患者IFNγ和TNFα含量比较（略）
　　3　讨论
　　细胞因子在炎症和免疫反应中起着介导和调节的双重作用，其中IFNγ， TNF α， IL2， IL6， 趋化因子与OLP 病理过程有关［3］. IFNγ， TNFα主要诱导感染黏膜中血管内皮表达地址素黏附分子，也可诱导血管细胞黏附分子和细胞间黏附分子的分泌和增加其在血管内皮层的表达，这两类黏附分子的表达使淋巴细胞更易通过血管壁而进入到结缔组织中. IFNγ， TNFα还能促进上皮产生趋化因子，刺激OLP 病变T 细胞增殖、通过激活基质金属蛋白酶9的分泌间接破坏上皮基底膜. 细胞因子间以网络的形式发挥作用，如IL2能诱导杀伤细胞产生TNFα， IL6可增加IL2的产生，这些都会促进OLP出现T 淋巴细胞浸润带. T淋巴细胞离开血管后，迁移到上皮细胞，由上皮细胞和相关炎性浸润细胞分泌的趋化因子所调控，趋化因子能促进选择性T细胞群黏附到血管内皮和迁移到靶组织［4］.

　　IFNγ是促动脉粥样硬化（AS）的细胞因子. 不稳定心绞痛患者血浆IFNγ浓度高于稳定心绞痛患者及非缺血性心脏病患者. IFNγ能减少胆固醇27羟化酶（具有抗AS形成的作用）的表达，并通过上调TNFα受体1和caspase8两种致凋亡分子的mRNA水平，诱导巨噬细胞的凋亡及随后凋亡的巨噬细胞活化产生过量的单核细胞趋化因子1，参与AS的发生与发展. TNFα在AS中大量表达，TNFα可能通过以下机制在CHD发生发展中起作用：诱导自身表达及使其他细胞因子及细胞黏附分子的表达增加；促进氧自由基释放，引起血管内皮损伤；诱导白细胞和血小板与内皮细胞黏附，使AS的炎症损伤加重；刺激血管平滑肌细胞增殖和收缩，促进AS斑块形成和AS损伤处的血管痉挛收缩；抑制心肌收缩力，抑制脂蛋白酯酶的合成，进而导致心脏恶液质，在调节炎症级联反应中可能起中心作用. 有实验表明TNFα在心肌梗死患者中的表达高于稳定性心绞痛患者和正常对照，CHD患者血清TNFα水平较对照组增高，说明TNFα与冠心病的严重程度密切相关［5-6］.
　　 结果表明，CHD+OLP组和CHD患者血清中IFNγ和TNFα的含量较健康对照组明显升高(P&<0.01)，说明这2种细胞因子在CHD和OLP的发病中有重要作用. CHD+OLP组患者血清中IFNγ和TNFα的含量也高于OLP组(P&<0.01)，这与CHD患者处在发病期，而IFNγ和TNFα具有正反馈调节作用有关，致使CHD+OLP组患者血清中IFNγ和TNFα的含量明显升高，促进炎性细胞进入感染部位，导致基质金属蛋白酶释放，细胞外基质蛋白降解，促进胶原纤维的破坏.
　　考虑CHD系多因素性疾病，各种因素是否会直接造成IFNγ和TNFα水平的变化还值得进一步细化分析. 另外，本研究结果支持IFNγ， TNFα与OLP， CHD的病理学机制均密切相关，CHD的发生发展可能与炎症引发的免疫反应密不可分，但OPL和CHD之间是否存在因果关系，或者病情演变过程中的先后关系和加重影响等还需进一步研究. 基于OLP和(或)CHD与炎症免疫存在某种相关性，抗炎和免疫调节的应用将日益受到关注.
【

参考文献

】
　　［1］Sher L. Effects of seasonal mood changes on seasonal variations in coronary heart disease: Role of immune system， infection， and inflammation［J］. Med Hypotheses， 2001，56(1):104-106.

　　［2］Thornhill MH. Immune mechanisms in oral lichen planus. ［J］. Acta Odontol Scand， 2001，59(3):174-177.

　　［3］Rhodus NL， Cheng B， Myers S. A comparison of the proinflammatory， NFkappaBdependent cytokines: TNFalpha， IL1alpha， IL6， and IL8 in different oral fluids from oral lichen planus patients［J］. Clin Immunol， 2005，114(3):278-283.

　　［4］Carrozzo M， Uboldi de Capei M， Dametto E. Tumor necrosis factoralpha and interferongamma polymorphisms contribute to susceptibility to oral lichen planus［J］. J Invest Dermatol， 2004，122(1):87-94.

　　［5］Miller GE， Freedland KE， Carney RM. Depressive symptoms and the regulation of proinflammatory cytokine expression in patients with coronary heart disease［J］. J Psychosom Res， 2005，59(4):231-236.

　　［6］李瑶琛，程碧珍，李康生. 突变型与野生型TNFα诱导肿瘤细胞的凋亡［J］. 第四军医大学学报，2005，26(25):2237-2240.