【关键词】 木瓜蛋白酶；脑梗塞；血栓溶解
0引言
精制木瓜蛋白酶(papain)是含木瓜蛋白酶、木瓜肽酶A、木瓜凝乳蛋白酶A和B的多酶复合体［1］，应用广泛. 本文就papain在体内是否具有纤溶酶原激活作用进行了探讨.
1材料和方法
1．1材料
日本大耳白兔10只，2.5±0.3 kg（本院实验动物中心）. papain（杰沃利公司），人胎盘纤溶酶原（plasminogen， PLG，本实验室纯化），尿激酶（UK）. 倒置电子显微镜，血管数字减影造影所用仪器（本院介入中心）.
1．2方法
1.2.1制备体外动脉血栓抽动脉血，制成0.7 mm×5 cm血栓.
1.2.2体外溶栓分组:（1）空白组（NS），（2）阴性对照组（NS＋200 mg/ mL PLG），（3）阳性对照组（0.67×103 kat /mL UK＋200mg/ mL PLG），（4）papain组（NS+3.33×103 kat / mL papain），（5）papain激活PLG活性组（3.33×103 kat / mL papain＋200mg/ mL PLG）. 置血栓于96孔板中；加相应试剂，每种试剂0.1 mL，37℃， 30， 60， 90 min. 电镜观察溶栓效果.
1.2.3制备兔脑血栓模型根据关微华等［2］方法，血管数字减影造影技术（DSA）造影示兔脑动脉形态正常. 注入血栓0.7 mm×5 cm，DSA造影示左MCA栓塞可靠.
1.2.4体内溶栓分组:（1）空白组（NS），（2）阴性对照组（NS＋10mg/kg PLG），（3）阳性对照组（33.34 kat /kg UK＋10 mg/kg PLG），（4） papain组（NS+0.17×103 kat/kg papain），（5）papain激活PLG活性组（0.17×103 kat/kg papain＋10 mg/kg PLG）. 加相应试剂，每组试剂总量2 mL，注入血栓中30， 60， 90 min，DSA观察溶栓效果.
2结果
2．1体外溶栓90 min，第 4组血栓未溶解，提示仅用papain不能溶解体外血栓. 30 min，第5组 血栓溶解，提示papain激活PLG体外溶栓（图1）. 兔脑血栓模型中梗塞后左MCA阻塞（图2）.
2．2体内溶栓90 min，第4组未再通，提示仅用papain体内无直接溶栓作用. 90 min， 第5组再通（图3），提示papain体内激活PLG溶栓.
3讨论
本实验观察到papain激活PLG活性组溶解兔左MCA血栓，初步证明了papain在家兔体内具有纤溶酶原激活活性；该结果为进一步研究papain的纤溶酶原激活活性提供了初步实验依据. 本实验所用papain是多酶复合体，其中哪一种成份具有纤溶酶原激活作用，尚需在进一步分离纯化的基础上深入研究.
参考文献
［1］吴显荣. 木瓜蛋白酶的开发与应用［J］.中国农业大学学报，2005，10（6）：11-15.
［2］关微华，赵育梅，徐超. 一种改良的大鼠脑血栓栓塞模型［J］.中华神经外科杂志，2006，22（4）：251-254.转贴于