P504S与p63鉴别前列腺良恶性病变的价值

【摘要】 　　目的： 探讨P504S与p63在前列腺良恶性病变鉴别诊断中的价值。 方法： 采用免疫组织化学方法检测105例前列腺穿刺及经尿道电切活检标本，其中40例为经尿道前列腺电切标本。 结果： 20例前列腺癌中P504S均呈阳性表达，15例高级别上皮内瘤变中有12例呈阳性表达，20例低级别上皮内瘤变及50例前列腺良性增生组织中均未见其表达。20例前列腺癌中均未见p63表达，15例高级别上皮内瘤变中有4例呈阳性表达，20例低级别上皮内瘤变均呈阳性表达，50例前列腺良性增生组织中有44例呈阳性表达。 结论： 联合检测前列腺病变组织中P504S与p63的表达，对鉴别前列腺良恶性病变有很大的帮助。

【关键词】 前列腺； 增生； 肿瘤； P504S； p63

　　［Abstract］Objective: To study the value of P504S and p63 in the differential diagnosis of prostate lesions. Methods： SP immunohistochemical staining was used to examine the expressions of P504S and p63 in105 prostate needle biopsy samples，40 prostate specimens which were excised transurethra. Results： The positive expression of P504S was observed in 20 prostate carcinomas and 12 highgrade prostatic intraepithelial neoplasias(HGPIN).No expression was observed in 20 lowgrade prostatic intraepithelial neoplasias(LGPIN) and 50 benign prostatic hyperplasia specimens. The positive expression of p63 was observed in 4 HGPIN， 20 LGPIN and all 50 benign prostatic hyperplasia specimens. No expression was observed in 20 prostate carcinomas. Conclusion： To detect the expressions of P504S and p63 in prostatic specimens was great useful to the diagnosis.

　　［Key words］prostate; hyperplasia; neoplasms; P504S; p63

　　在临床病理诊断工作中，对前列腺活检及电切标本，单靠HE切片有时难以判断前列腺病变的良、恶性。近年来，随着基底细胞抗体逐渐应用于前列腺病理诊断中，前列腺肿瘤的诊断可靠性已有了显著的改善。

　　我们应用免疫组织化学方法对40例前列腺活检及电切标本中基底细胞标记p63与前列腺癌的标记物P504S（α甲酰基辅酶A消旋酶）进行了联合检测，以探讨其在诊断前列腺良恶性病变方面的价值。现报告如下。

　　1 材料和方法

　　1.1 材料
　　
　　收集盐城市建湖县人民医院及盐城市第一人民医院2005年1月～2007年1月间前列腺穿刺及经尿道电切活检标本105例，其中40例为经尿道前列腺电切标本。105例标本中前列腺增生（BPH）50例，前列腺上皮内肿瘤（PIN）35例，前列腺癌（PA）20例。标本均用10%甲醛固定，石蜡包埋，4 μm厚连续切片，分别作HE 染色和免疫组化染色。患者年龄35～80岁，平均年龄51.2岁。

　　1.2 主要试剂

　　P504S与p63单克隆抗体、SP试剂盒、DAB显色试剂盒购自福州迈新公司。

　　1.3 免疫组化方法

　　按SP试剂盒操作说明书进行。石蜡切片脱蜡水化，微波加热抗原修复，免疫组化染色，DAB显色，苏木素复染。PBS代替一抗作阴性对照。

　　1.4 结果判断

　　P504S阳性表达定位于肿瘤细胞的细胞质，p63阳性染色定位于基底细胞的细胞核。以半定量积分法［1］判断每张切片P504S 与p63的表达结果，以阳性细胞比例与显色强度计分：阳性细胞比例在1/3以下为1分，1/3～2/3为2分，2/3以上为3分；细胞无着色为0分，浅黄色为1分，棕褐色为3分；根据两者之和判断等级：0分为阴性，2分为弱阳性，3～4分为阳性，&>4分为强阳性。

　　1.5 统计学处理
　　
　　数据采用χ2检验，P&<0.05为有统计学意义。

　　2 结果

　　2.1 P504S在不同前列腺病变组织中的表达

　　P504S阳性信号呈棕黄色颗粒状，定位于肿瘤细胞的细胞质。20例前列腺癌中均呈阳性表达，阳性率为100％；35例前列腺上皮内肿瘤中，15例高级别上皮内瘤变中有12例阳性，阳性率80.0%，20例低级别上皮内瘤变未见阳性；50例前列腺良性增生组织中均未见其表达。见表1。表1 P504S在不同前列腺病变中的表达（略）

　　2.2 p63在不同前列腺病变组织中的表达

　　p63阳性信号呈棕黄色颗粒状，定位于基底细胞的细胞核。20例前列腺癌中均未见其表达；35例前列腺上皮内肿瘤中，15例高级别上皮内瘤变中有4例阳性，阳性率为26.7％，20例低级别上皮内瘤变均为阳性，阳性率为100％；50例前列腺良性增生组织中有4例未见其表达，阳性率为92.0％。见表2。表2 p63在不同前列腺病变中的表达（略）

　　3 讨论

　　自前列腺特异性抗原（PSA）被应用于前列腺癌的普查以来，进行前列腺活检的患者日渐增多，由于许多前列腺疾病在诊断时缺乏典型的HE特征，因此单靠HE切片很难将微小癌与良性前列腺病变进行区分。近年来，随着免疫组化技术的发展，p63作为新的基底细胞标记以及前列腺癌标记物（P504S）逐渐被临床诊断所采用。
　　
　　XU等［2］发现P504S选择性地表达在PA上，极少或几乎不表达在良性的前列腺组织中，用兔单克隆抗体生成的抗P504S免疫组化标记，发现在前列腺肿瘤阳性，而在良性的前列腺组织中阴性。Luo等［3］用定量PCR技术，证实PA中P504S mRNA比正常前列腺组织高出9倍以上。多位学者用各种前列腺标本组织，通过半定量可视化分析或数字图像分析方法得出共同的结论：P504S在PA中有强阳性免疫反应，其敏感性范围82％～100％，特异性79％～100％。本试验中20例前列腺癌的组织中都有P504S的表达。15例高级别上皮内瘤变的组织中有12例呈现P504S弱阳性表达，但是在20例低级别上皮内瘤变的组织中及50例前列腺增生组织中均未见其表达，与Jiang等［4］的结果一致。说明P504S不仅可出现于PA中，也可出现于癌前病变中。Evans［5］总结了P504S免疫组化标记支持恶性诊断的标准：①在低倍镜下易见强阳性；②在HE下有恶性特征的腺泡细胞胞质呈弥漫的环状、颗粒状或腔缘阳性；③邻近的良性腺体阴性或不连续阳性，前列腺基底层一般不着色。

　　p63是一个公认的新的基底细胞特异性标志，前列腺基底细胞标记物染色阳性可支持良性前列腺病变的诊断：免疫组化标记阴性则证明可疑腺体缺乏基底细胞层，从而支持恶性诊断。本试验中20例前列腺癌的组织中都未见有p63的表达。15例高级别上皮内瘤变的组织中有4例呈现p63弱阳性表达，但是在20例低级别上皮内瘤变的组织中及46例前列腺增生组织中均呈强阳性表达。在4例前列腺良性增生性病变中p63表达阴性，我们认为这可能是一些单纯性萎缩腺体或染色不良的腺体。由于高级别上皮内瘤变的组织再次活检发现癌症的可能性为27％～79％，且其组织中存在基底细胞而前列腺癌中不存在，因此将P504S与基底细胞标记物p63结合起来应用，有助于高级别上皮内瘤变与前列腺癌的鉴别诊断。

　　本研究结果表明，前列腺癌组织缺乏完整的基底膜，P504S作为前列腺癌较敏感及特异的标记物，在前列腺癌中多呈阳性表达，但阳性者不全是癌；良性组织中呈阴性表达，但不是全部的良性组织都会阴性，因此对前列腺标本进行P504S及 p63的联合检测，可使前列腺组织的良、恶性诊断更为准确。

参考文献

　　［1］Thorson PA.Minimal adenocarcinoma in prostate needle［J］.Am J Clin Pathol，2000，114(6):896-909.

　　［2］Xu J，Stolk JA，Zhang X，et al.Identification of differentially expressed genes in human prostate cancer using subtraction and microarray［J］.Cancer Res，2000，60(6):1677-1682.

　　［3］Luo J，Zha S，Gage WR，et al.AlphamathylacylCoA racemase:a new molecular marker for prostate cancer［J］.Cancer Res，2002，62(8):2220-2226.

　　［4］Jiang Z，Wu CL，Woda BA，et al.P504S/alphamethylacylCoA racemase:useful marker for diagnosis of small foci of prostatic carcinoma on needle biopsy［J］.Am J Surg Pathol，2002，26(9):1169-1174.

　　［5］Evans AJ.Alphamethylacyl CoA racemase(P504S):overview and potential uses in diagnosis pathology as applied to prostate needle biopsies［J］.Clin Pathol，2003，56(12):892-897.