新生儿外周血及胃液乙肝标志物与宫内感染关系的分析

　　　　　　　　　　 作者：邵中军，李晶华，徐德忠，徐剑秋，门可，崔恒春，闫永平，张景霞

【摘要】 目的： 探讨新生儿外周血及胃液HBeAg， HBsAg等标志物与乙型肝炎病毒宫内感染的关系. 方法： 连续收集母亲外周血标本和新生儿外周血及胃液标本，ELISA检测HBeAg， HBsAg， PCR方法检测HBV DNA；以ABBOTT试剂检测新生儿HBsAg. 采用χ2检验等统计学方法对结果进行统计分析. 结果： 共收集133例母亲、新生儿血标本和胃液标本. 58例胃液HBsAg阳性，9例胃液HBeAg阳性. HBV DNA均阴性，其中发生宫内感染5例. 统计学检验显示新生儿外周血HBeAg、胃液HBsAg与乙肝病毒宫内感染有关系，而胃液HBeAg阳性与乙肝病毒宫内感染没有关系 (P=0.415). 结论： 新生儿外周血HBeAg与胃液HBsAg与乙肝病毒宫内感染有关；但是由于所有标本HBV DNA均阴性，尚不支持乙肝病毒宫内感染的胃液途径.

【关键词】 肝炎表面抗原，乙型；宫内传播；肝炎，乙型

　　【Abstract】 AIM: To estimate the relationship of hepatitis B virus (HBV) intrauterine trarsmission to HBeAg or HBsAg in neonatal peripheral serum or gastric aspirates. METHODS: Gastric samples from neonates and serum samples from both mothers and neonates were consecutively collected and detected with ELISA for HBsAg or HBeAg and with PCR for HBV DNA in gastric samples. Chi square test and Fishers exact test were employed to find out the significance. RESULTS: A total of 133 neonatal gastric aspirates were collected and 58 of them were detected positive for HBsAg， 9 positive for HBeAg. All were detected negative for HBV DNA， 5 had intrauterine infection. Statistical analysis indicated that association of HBsAg in gastric aspirates， HBeAg in peripheral serum with HBV intrauterine transmission was significant， but HBeAg in gastric aspirates was not. CONCLUSION: Although HBsAg in gastric aspirates and HBeAg in peripheral serum are associated with HBV intrauterine transmission， HBV DNA was not found in gastric aspirates. Therefore， neonatal acquired HBV by gastric fluid routine is not conclusive.

　　【Keywords】 hepatitis B surface antigens; intrauterine transmission; hepatitis B

　　0引言

　　乙型肝炎（hepatitis B， HB）是一种严重危害人类健康的传染病. 我国是乙肝高发区，人群感染率高达60%. 乙肝表面抗原(Hepatitis B virus surface antigen， HBsAg)携带者亦高达10%~15%. 乙型肝炎年病毒（Hepatitis B virus， HBV）携带者超过1.2亿，其中大多数为母婴传播所致［1］. 目前的危险因素研究都是以母亲为核心进行的，而新生儿的乙肝标志物还没有进行过深入研究. Chen等［2］首次探讨了新生儿胃液HBsAg与HBV宫内感染的关系，他们发现发生宫内感染新生儿其胃液HBsAg均阳性，但其联系的强度、意义尚待深入研究.

　　1对象和方法

　　1.1对象

　　200210/200407陕西省妇幼保健院待产的、HBsAg阳性孕妇及其新生儿为研究对象. 采集孕妇肘静脉血和新生儿股静脉血，离心分离血清，低温保存. 新生儿出生后、进食前立即收取胃液，低温保存备用.

　　1.2方法

　　新生儿胃液HBeAg， HBsAg检测均采用ELISA方法进行；诊断试剂盒购于科华生物工程有限公司（上海）；胃液标本HBV DNA检测采用PCR方法，引物及扩增方法参见文献［3］. 新生儿股静脉血HBsAg采用Abbott 公司的HBsAg诊断试剂进行检测，检测程序及结果阅读在Abbott System上自动完成，以S/N≥5为宫内感染诊断标准.

　　2结果

　　2.1一般情况共收集临床检验HBsAg阳性孕妇133例及其所产新生儿135例. 新生儿血清或胃液不足或已不适于ELISA检测2例，故实际检测的病例数为133例.

　　2.2新生儿胃液检测结果和外周血ELISA检测结果依据我们的诊断标准，共有5例新生儿发生宫内感染. 133例新生儿中有58例胃液HBsAg阳性，75例胃液HBeAg， HBsAg均阴性. 胃液HBeAg阳性9例，胃液HBsAg和HBeAg同时阳性7例，新生儿胃液HBV DNA PCR检测均为阴性.

　　2.3胃液HBsAg阳性新生儿外周血及其母亲外周血HBeAg检测我们对58例胃液HBsAg阳性新生儿外周血及其母亲外周血也检测了HBeAg. 共检测到15例HBeAg阳性孕妇. 这15例HBeAg阳性孕妇所产的16例新生儿有11例HBeAg阳性(68.75%，11/16). 精确检验显示新生儿胃液HBsAg与乙肝病毒宫内感染有关系(P=0.015，表1），而HBeAg阳性与乙肝病毒宫内感染没有关系 (P=0.415，表2）. 本次调查的57名孕妇中，HBeAg阳性孕妇15例(26.31%)，发生宫内感染3例. 精确检验显示母亲、新生儿HBeAg都与乙肝病毒宫内感染有关(表3). 表1新生儿胃液HBsAg与宫内感染的关系（略）表2新生儿胃液HBeAg与宫内感染的关系(略)表3外周血HBeAg阳性对乙肝病毒宫内感染的关系（略）

　　2.4新生儿外周血、胃液HBsAg， HBeAg分布差异比较 新生儿外周血标本HBeAg的传播率为68.75%（11/16），HBsAg宫内传播率为5.17%(3/58)；而在胃液标本中HBeAg的传播率为31.03%(9/29)，HBsAg的阳性率为43.61%(58/133). χ2检验显示HBeAg在新生儿外周血、胃液中的分布相一致（P＝0.62）；而HBsAg在新生儿外周血、胃液中的分布是不一致（P&<0.01）.

　　3讨论

　　Wang等［3］在7例HBeAg阳性母亲的新生儿静脉血检测到HBeAg，且新生儿HBeAg滴度都低于他们的母亲，本研究对部分新生儿股静脉血血清HBeAg和母亲血清HBeAg进行检测，共检出16例阳性母亲，其所产新生儿有11例HBeAg阳性. 新生儿外周血HBeAg阳性率明显高于外周血HBsAg阳性率，提示HBeAg和HBsAg跨越胎盘的机制可能不同.

　　胎儿发育过程中如果在宫内暴露于一些免疫源性物质则易引起免疫耐受. Chen等［4］用HBeAg决定多肽表位p120131刺激HBeAg转基因雌性小鼠的子代(F1)和正常小鼠，发现HBeAg转基因小鼠的子代小鼠抗原刺激后淋巴细胞增生能力明显低于正常小鼠，提示宫内暴露于HBeAg可引起免疫耐受［5］. 本次研究发现不仅验证了母亲HBeAg阳性仍然是HBV宫内感染的危险因素［1］；同时也发现新生儿HBeAg与HBV宫内传播也有关. HBeAg是否是通过影响胎儿免疫系统，进而增加感染的风险，有待于深入研究.

　　Chen等［6］对新生儿胃液进行HBsAg检测，发现宫内感染新生儿其胃液HBsAg均阳性. 本次研究结果显示新生儿胃液HBsAg与HBV宫内感染有关系(P=0.015)，而胃液HBeAg阳性与HBV宫内感染没有关系 (P=0.415). 同时，本次研究结果显示胃液标本HBV DNA全阴性，而单一的HBsAg阳性还不足以说明完整的HBV病毒颗粒的存在. 因此，尚不支持HBV宫内感染的消化道途径，新生儿胃液HBsAg阳性与HBV宫内感染的关系也有待于深入的研究.

【参考文献】
　　［1］Xu DZ， Men K， Choi BC， et al. Risk factors and mechanism of transplacental transmission of hepatitis B virus: A casecontrol study ［J］. J Med Virol 2002;67:20-26.

　　［2］Chen WH， Yin CS， Chang Y K， et al. Neonatal gastric aspirates as a predictor of perinatal hepatitis B virus infections［J］. Int J Gyn Obst， 1998，60(1): 15-21.

　　［3］邵中军，徐德忠，徐剑秋，等. 孕期性行为与乙型肝炎病毒宫内感染关系的病例对照研究［J］.中华流行病学杂志，2005，26(4):232-235.

　　［4］Wang JS， Zhu QR. Infection of the fetus with hepatitis B e antigen via the placenta［J］. Lancet， 2000，355(9208):989.

　　［5］Chen M， Slberg M， Thung SN， et al. Modeling the Thelper cell response in acute and chronic hepatitis B virus infection using Tcell receptor transgenic mice［J］. Antiviral Research， 2001，52:99-111.

　　［6］Wang Z， Zhang J， Yang H， et al. Quantitative analysis of HBV DNA level and HBeAg titer in hepatitis B surface antigen positive mothers and their babies: HBeAg passage through the placenta and the rate of decay in babies［J］. J Med Virol. 2003;71(3):360-366.