银杏叶片联合布地奈德吸入治疗对哮喘儿童辅助性T细胞亚群的调节作用

　　　　　　 作者：忻悦， 吕进泉， 吕剑平， 唐燕， 张晓鸣

【摘要】 　　目的： 观察银杏叶片联合布地奈德对哮喘儿童外周血辅助性T细胞（Th）亚群的影响。方法： 65例中、重度哮喘儿童随机分为两组：激素治疗组34例，单纯吸入布地奈德气雾剂治疗6个月；联合治疗组31例，吸入布地奈德气雾剂且同时口服银杏叶片6个月。测定治疗前后血浆中IL4，IFNγ水平，同时以20例健康儿童为正常对照组。结果： 两哮喘组治疗前、后血浆IFNγ水平均低于正常对照组（P＜0.01），治疗后IFNγ水平均高于治疗前（P＜0.01），两哮喘组治疗后IFNγ水平无明显差异（P＞0.05）；两哮喘组治疗前、后血浆IL4和IL4/IFNγ均显著高于正常对照组（P＜0.01或P＜0.05）；治疗后两组IL4和IL4/IFNγ均下降（P＜0.01），且联合治疗组低于激素治疗组（P＜0.01）。结论： 银杏叶片与布地奈德具有协同作用，联合应用更有利于纠正失衡的Th亚群。

【关键词】 哮喘； 白细胞介素4； γ干扰素； T淋巴细胞亚群； 银杏叶

　　［Abstract］Objective: To observe the effects of Ginkgo biloba tablets plus aerosol budesonide on T helper cell subsets in children with asthma.Methods： Sixtyfive children with moderate or severe asthma were randomizedly pided into two asthma groups: 34 cases were adopted as budesonide group， which were treated with inhalation of budesonide alone for 6 months，and other 31 cases were adopted as the combined therapy group， which were treated with inhalation of budesonide and oral Ginkgo biloba tablets also for 6 months. The normal control group was 20 healthy children. ELISA was used to determine the serum concentrations of IFNγ and IL4. Results： The serum concentrate ration of IFNγ before and after the treatment in the combined therapy group and the budesonide group was decreased than that of normal group(P＜0.01)， and in the two asthma groups， the serum concentrate ration of IFNγ after treatment was increased than that of before treatment(P＜0.01)， but the serum IFNγ in the two asthma groups after treatment had no significant difference(P＞0.05). The IL4 and IL4/IFNγ levels before and after treatment in the combined therapy group and the budesonide group were higher than those of the normal group(P＜0.01 or P＜0.05)， the above levels after the treatment in the two asthma groups were lower than those before the treatment(P＜0.01)， and those levels after treatment in the combined therapy group were lower than those in the budesonide group(P＜0.01). Conclusion： Ginkgo biloba tablets had synergistic effects with budesonide and might adjust T helper cell subsets better in children with asthma.

　　［Key words］asthma; interleukin4; interferonγ； Tlymphocyte cell subsets; Ginkgo biloba

　　哮喘患者存在辅助性T细胞（Th）亚群失衡，哮喘的本质是气道的炎症反应，已有研究表明，血小板活化因子（PAF）作为重要的炎性介质参与了哮喘的发病机制［1］，抗PAF是哮喘治疗研究的方向之一。银杏叶的主要成分为银杏苦内酯，其具有很强的拮抗PAF的作用，本研究旨在探讨银杏叶片对哮喘儿童外周血Th亚群失衡的影响。
　　
　　1 对象与方法
　　
　　1.1 病例选择
　　
　　65例哮喘儿童为2006年1月～2007年9月因哮喘呈中、重度急性发作初次来我院就诊者，男39例，女26例；年龄6～14岁，平均8.2岁；中度哮喘35例，重度哮喘30例，诊断符合儿童哮喘防治常规的诊断标准［2］，随机分为两组：激素治疗组34例，联合治疗组31例，治疗开始时停用激素治疗至少1个月以上。正常对照组20例为年龄和性别与哮喘组相匹配的门诊健康体检儿童。
　　
　　1.2 治疗方法
　　
　　激素治疗组：吸入布地奈德气雾剂200 μg，每日3次，持续6个月；联合治疗组：在以上治疗基础上加服银杏叶片（扬子江药业集团产品）2片（80 mg），每日3次，持续6个月，在此期间如有喘息严重发作，给予沙丁胺醇气雾剂吸入。两组均分别于治疗前后留置血液3 ml，2小时内3 000 r/min离心10 min，取血浆于EP管内，－70℃冰箱保存待测，正常对照组于体检时留置血液标本。

　　
　　1.3 血浆IL4，IFNγ的检测
　　
　　用ELISA检测试剂盒测定IL4，IFNγ水平，试剂盒购自武汉晶美生物工程有限公司。
　　
　　1.4 统计学处理
　　
　　血浆IL4和IFNγ含量以均数±标准差（±s）表示，多组间比较用方差分析，两组间比较用t检验，P＜0.05为差异有统计学意义。
　　
　　2 结果
　　
　　两哮喘组治疗前、后血浆IFNγ水平均低于正常对照组（P＜0.01），治疗后IFNγ水平均高于治疗前（P＜0.01），两哮喘组治疗后IFNγ水平无明显差异（P＞0.05）；两哮喘组治疗前、后血浆IL4和IL4/IFNγ均显著高于正常对照组（P＜0.01或P＜0.05）；治疗后两组IL4和IL4/IFNγ均下降（P＜0.01），且联合治疗组低于激素治疗组（P＜0.01）。见表1。表1 各组血浆IFNγ，IL4和IL4/IFNγ水平比较，Tab 1 Levels of plasma IFNγ，IL4和IL4/IFNγ in all groups（略）。

　　3 讨论
　　
　　Th分为Th1和Th3两种类型，Th3分泌的细胞因子增多，Th1型细胞因子减少，两者间的失衡是哮喘发病的关键机制［3］。Th1分泌 IFNγ，Th3分泌IL4和IL5，IL4/IFNγ可间接反映Th3类细胞和Th1类细胞间的平衡。本组资料表明哮喘患儿在治疗前血浆中IL4高于正常对照组，IFNγ低于正常，因而IL4/IFNγ显著增高，表明哮喘患者Th3功能相对亢进。Th3分泌的IL4是促进嗜酸性粒细胞聚集、增生的重要细胞因子，嗜酸性粒细胞聚集于气道可释放多种其他炎症介质，两者共同作用，促使哮喘患者产生以嗜酸性粒细胞浸润为主的气道变应性炎症。
　　
　　激素作为非特异性炎性介质拮抗剂是目前治疗哮喘的基本药物，本研究表明，激素治疗组治疗后血浆IL4明显下降，而IFNγ亦有上升，但IL4/IFNγ仍高于正常，表明激素具有部分逆转Th亚群失衡的作用。近年来，随着人们对多种炎性介质及其拮抗剂研究的不断深入，特异性炎性介质拮抗剂已成为哮喘治疗的发展方向。目前，白三烯受体拮抗剂已用于哮喘的临床治疗，而在众多炎性介质中， PAF是已知最强的支气管致痉剂，有研究证实哮喘患者体内PAF水平明显增高［1］。
　　
　　银杏叶片是由银杏叶的提取物精制而成，主要成分为银杏苦内酯。银杏叶制剂具有拮抗PAF的作用，动物实验表明银杏叶提取物能防止小鼠哮喘模型支气管-肺泡灌洗液中炎性细胞浸润，并降低IL4的水平［4］；在应用银杏叶片治疗哮喘患者临床疗效的研究中证实，银杏叶片能使哮喘儿童诱导痰液中嗜酸性粒细胞数量下降，使痰液中IL4水平降低，并改善哮喘患者肺功能、提高临床症状控制率［5，6］。本组资料表明，对中重度哮喘患儿，银杏叶片联合布地奈德吸入治疗组IL4水平下降更为明显，IL4/IFNγ亦显著低于单纯应用布地奈德吸入治疗组，提示银杏叶片配合布地奈德治疗支气管哮喘具有协同作用，能更好地调节Th亚群失衡。由于银杏叶片使用方便，价格便宜，经临床观察，未发现明显不良反应，因此银杏叶片可以用于哮喘的防治，对此值得进一步研究。

参考文献

　　［1］吕进泉，周弘，吕剑平，等. 哮喘患儿血浆血栓素B2，6酮前列腺素F1α和血小板活化因子水平变化及意义［J］. 实用儿科临床杂志，2003，18（6）：445-446.

　　［2］中华医学会儿科学分会呼吸学组. 儿童支气管哮喘防治常规（试行）［J］. 中华儿科杂志，2004，42（2）：100-106.

　　［3］Wiidruff PG， Fahy JV. Asthma: prevalence， pathogenesis， and prospects for novel therapies［J］. JAMA， 2001，286(4):395-398.

　　［4］Mahmoud F， Abul H， Onadeko B， et al. In vitro effects of Ginkgolide B on lymphocyte activation in atopic asthma: comparison with cyclosporin A［J］. Jpn J Pharmacol， 2000， 83(3): 241-245.

　　［5］吕剑平，吕进泉，忻悦，等.银杏叶片联合布地奈德吸入治疗对哮喘儿童气道炎症和辅助T细胞亚群的影响［J］. 江苏医药，2008，34（12）：1215-1217.

　　［6］李昆，侯杰. 银杏叶片对哮喘炎性细胞浸润的影响及疗效观察［J］. 中华结核和呼吸杂志，2000，23（3）：171.