卵巢肿瘤是妇科常见肿瘤，以上皮性癌较为多见，发病率、病死率均较高，是妇科最严重的恶性肿瘤之一。细胞凋亡、增殖异常是卵巢肿瘤的病理基础[1]。K-i 67与卵巢癌增殖活性密切相关，配对核基因2( paired box gene 2，PAX2)作为配对核基因家族的一员，与泌尿生殖道分化、胚胎的发生密切相关，参与调控细胞内信号传导，既往存在K-i 67、PAX2各自与卵巢肿瘤相关性研究，但尚无联合标记的研究，本文通过PAX2、K-i 67的在卵巢浆液性腺癌中检测，分析表达状态及与各参数间的关系，以探讨PAX2、K-i 67联合标记的临床意义。
1 临床资料
选择我院2006年至2012年间的56例卵巢浆液性腺癌的病理标本，所选病例相关临床病理资料完善，均明确诊断为卵巢浆液性腺癌，排除其他组织学类型。组织学分级依据MDACC分级系统，分高级别和低级别，其中低级别主要标准为细胞大小较均一、圆形或卵圆形、染色质分布均匀、核仁中等大小，次要标准为核分裂≤12个/10 HPF；高级别主要标准为大小不一、形态不一、染色质分布不均匀、大核仁或红核仁，次要标准为核分裂 ＞12 个/10 HPF。
2 方法
2.1检测方法
所有标本均经过4% 中性甲醛液固定，常规石蜡包埋，连续切片，免疫组化采用EnVision 二步法，石蜡切片常规脱蜡并由pH 6. 0 的柠檬酸抗原修复，滴加一抗(Pax2兔抗人多克隆抗体、Ki-67 单克隆抗体) ，于5 ℃ 孵育 12 h。清洗后滴加二抗孵育 0. 5 h，DAB 显色。所切切片经由病理学专家盲法认定。
2.2 评估标准
镜下判断Pax2和ki67的表达情况，以肿瘤细胞核中出现棕黄色颗粒为阳性判定标准，计数阳性细胞数，以阳性细胞占总计数细胞的比率进行判定，根据着色的程度将表达强度分为(-):无着色细胞;(+):阳性细胞<5%,着色淡;(++):阳性细胞≥5%,<35%,中度着色;(+++):阳性细胞≥35%,着色深。
2.3 数据处理
采用 SPSS 16. 0( SPSS Inc. ) 统计软件进行分析处理，组间差异性比较采用 Pearson χ2检验及等级相关分析。
3 结果
3.1 PAX2、Ki-67在卵巢浆液性腺癌中的表达与临床病理参数的关系 研究结果显示PAX2 的表达水平与肿瘤临床分期、组织学分级组间比较有显著差异( P＜0. 05) ，而肿瘤是否有转移无差异( P ＞0. 05) ；Ki-67的表达水平与肿瘤是否转移、组织学分级组间比较有显著差异( P ＜ 0. 05) ，而肿瘤临床分期无差异( P＞0. 05) ，见表1
表1 PAX2、Ki-67在卵巢浆液性腺癌中的表达与临床病理参数的关系
3.2卵巢浆液性腺癌中PAX2 与 Ki-67 在卵巢浆液性癌中表达的相关分析
所选56例病例中，Ki-67 阳性者 31 例，PAX2阳性者24例，其中PAX2 与 Ki-67同为阳性的20例，Ki-67阳性而PAX2 阴性的11例，Ki-67阴性而PAX2阳性的4例，两者同为阴性的6例（p<0.05），表明PAX2 与 Ki-67在卵巢浆液性腺癌中表达呈正相关性。
4 讨论
卵巢肿瘤是妇科常见恶性肿瘤之一，其中又以上皮性癌多见可高达90%，其发病原因多样，细胞凋亡和增殖平衡紊乱构成卵巢肿瘤发病及进展的病理基础，有着重要的作用[2]。PAX2 调控细胞信号传导，Ki-67标记着肿瘤细胞增殖情况，或多或少与卵巢肿瘤的关系较为密切，了解卵巢肿瘤患者的PAX2 与 Ki-67表达水平，一定程度上可以对卵巢肿瘤的生物学行为进行评估，并判定其危害性，评估肿瘤的预后情况，反映肿瘤细胞目前的一个活性状态。
PAX2 家族共有9个基因，根据基因组序列、结构的相似性及其在组织器官中的表达方式将9个基因分属4个不同类别为PAX1/PAX9，PAX2 / PAX5 / PAX8，PAX4 / PAX6，PAX3 /PAX7。PAX2是配对核基因，参与泌尿生殖系统的分化、胚胎的发育，其特别编码转录因子决定了生殖泌尿系统的发生、发展，在动物体内广泛存在，调控细胞内信号的传导，参与胚胎的发生，直到器官进入终末期其表达开始减弱[3]。大量关于间质-上皮转化与WNT信号通路的研究，表明对WNT信号通路起反响调控作用的PAX2可导致相关细胞的异常增殖，与肿瘤的发生、发展密切相关。
Ki-67作为判断良恶性肿瘤及恶性成都的指标，广泛应用于多种肿瘤。在卵巢恶性肿瘤组织中呈现高表达，提示肿瘤细胞异常增生。在卵巢肿瘤中Ki-67表达明显增多，在具体分布部位及数量上存在一定的异质性，表明卵巢肿瘤的细胞增殖并不同步[4]。其肿瘤细胞增殖分化程度越差，增殖速度越快，表明肿瘤的恶性成都越高，Ki-67在反应卵巢肿瘤细胞增殖状态上有一定的效果。有研究显示Ki-67在卵巢癌残留者的表达率为百分之百，进一步说明卵巢癌残留患者预后不佳。
本文研究结果提示，Ki-67 阳性者 （55%）31 例，PAX2阳性者（43%）24例，均有高表达；PAX2 的表达水平与卵巢浆液性腺癌临床分期、组织学分级组间比较有显著差异，而与肿瘤是否有转移无差异，PAX2表达指数对临床判断卵巢浆液性腺癌的恶性程度及临床分期有一定价值；Ki-67的表达水平与卵巢浆液性腺癌是否转移、组织学分级组间比较有显著差异，而与其临床分期无差异，Ki-67表达指数对临床判断卵巢浆液性腺癌的恶性成都及是否存在转移有实用价值。此外，Ki-67和PAX2的表达呈现正相关，提示Ki-67和PAX2均可作为肿瘤细胞增殖的标记物，可以联合应用于临床检测卵巢浆液性腺癌的恶性程度、是否转移及临床分期的情况，对临床合理治疗卵巢浆液性腺癌及判断预后有着重要的临床意义。
【参考文献】
[1]王帅，马晓艳，夏阳.上皮性卵巢癌组织中 Ki67 和 PCNA 的表达及有丝分裂指数[J].四川大学学报，2010，41（4）：575-580.
[2]周虹,杨竹,蔡汉钟,等.K-i 67抗原在卵巢肿瘤组织中的表达及意义[J].重庆医学,2005,34(2)25:2.
[3]Robson EJ，He SJ，Eccles MR. A PANorama of PAX genes incancer and development［J］. Nat Rev Cancer，2006，6 ( 1 ) :52-62．
[4]吕艺.上皮性卵巢癌 ki-67 基因表达及意义[J].黑龙江医学，2008，32(1):3-4.