本文是一篇药学论文，本实验的尾静脉注射和鼻腔给药剂量根据肌注灯盏细辛注射液的临床用量确定。在预实验中，采用同等剂量灌胃给药时，部分时间点的大鼠血浆样品中检测不到野黄芩苷镁。
第一部分野黄芩苷镁鼻用原位凝胶的处方前研究
材料与方法
1仪器与材料
1.1仪器
HZQ-C气浴恒温振荡器金坛市天竟实验仪器厂Velocity 14R低温高速离心机Dynamica Co.Ltd,USAAgilent1260型高效液相色谱仪美国Agilent公司METTLERTOLEDO实验室pH 计瑞士梅特勒-托利多仪器（上海）有限公司AG-254电子分析天平瑞士梅特勒-托利多公司LGJ-22D冷冻干燥机北京四环科学仪器厂有限公司JA2003型电子天平上海精科天平仪器有限公司
1.2材料
野黄芩苷镁自制，批号：20201224，纯度：96.86%野黄芩苷对照品中国食品药品检定研究院，批号：110842-202010，HPLC≥91.5%磷酸二氢钾天津市福晨化学试剂厂氢氧化钠天津欧博凯化工有限公司正辛醇天津欧博凯化工有限公司娃哈哈纯净水天津娃哈哈食品有限公司乙腈（色谱级）美国MREDA公司甲醇（色谱级）美国MREDA公司磷酸（色谱级）美国MREDA公司
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2方法
2.1分析方法的建立与验证
2.1.1色谱条件
Agilent C18色谱柱（5µm，250 mm×4.6 mm），流动相为乙腈-0.1%磷酸水（22∶78，v:v），检测波长为335 nm，流速为1.0 mL /min，柱温为30℃，进样量10µL。
2.1.2溶液制备
对照品溶液：精密称取野黄芩苷对照品适量，置于50 mL 容量瓶中，加甲醇超声溶解，放置室温，定容，制成196.392μg/mL的对照品溶液。
供试品溶液：精密称取野黄芩苷镁适量，置于50 mL 容量瓶中，加纯水超声溶解，放置室温，定容，摇匀，即得。
2.1.3专属性考察
分别取野黄芩苷对照品溶液和供试品溶液，按“2.1.1”色谱条件下进样后，记录色谱图，考察专属性。
2.1.4线性关系考察
精密量取上述“2.1.2”制备的野黄芩苷对照品溶液适量，置于10 mL 容量瓶中，加入甲醇成倍稀释成系列野黄芩苷对照品溶液，质量浓度分别为6.137，12.275，24.549，49.098，98.196，196.392μg/mL。依次经0.45μm微孔滤膜过滤后，取续滤液，按“2.1.1”色谱条件进行测定，记录峰面积。以峰面积为纵坐标（Y），质量浓度为横坐标（X），绘制标准曲线，计算相关系数R2。
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结果
1分析方法的建立与验证
1.1专属性考察
野黄芩苷对照品溶液、野黄芩苷镁供试品溶液和空白溶剂的色谱图如图1-1所示，野黄芩苷和野黄芩苷镁的峰形较好且与基线完全分离，二者的保留时间为6.60 min，空白溶剂对野黄芩苷镁的测定无干扰，表明该方法专属性良好。
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2野黄芩苷镁平衡溶解度的测定
野黄芩苷镁在纯水，pH值为5.5和6.8磷酸缓冲溶液中的平衡溶解度见表1-2。由表可知，野黄芩苷镁在纯水中的溶解度稍高于pH 5.5和6.8磷酸缓冲溶液，但是差异较小。溶解度顺序为水>pH 5.5>pH 6.8。
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第三部分野黄芩苷镁鼻用温敏原位凝胶在大鼠体内的药动学研究........................47
前言.................................47
材料与方法..............................47
结果....................................50
第四部分野黄芩苷镁鼻用温敏原位凝胶在大鼠体内的脑靶向性研究......................59
前言.................59
材料与方法............................59
结果..............................62
讨论
1.UPLC-MS/MS方法的建立：本试验在处理血浆的时候加入了磷酸，使野黄芩苷镁转化成了野黄芩苷，并且野黄芩苷镁和野黄芩苷对照品的[M-H]-和特征碎片离子一致。因此，野黄芩苷镁的测定方法是建立在野黄芩苷测定方法的基础上的。
2.血浆样品预处理方法：有效的生物样品处理办法对于消除杂质干扰，保证实验准确极其重要。本试验采用蛋白沉淀法处理血浆样品，考察了甲醇、乙腈以及甲醇乙腈的不同比例作为沉淀剂，发现甲醇作为沉淀剂时，野黄芩苷镁的响应值高、稳定性好、内源性杂质干扰少，提取回收率和基质效应均符合生物样品的要求。且蛋白沉淀法比液液萃取法简单方便，节省大量的时间。因此最终选择蛋白沉淀法处理样品，以甲醇作为沉淀剂。
3.内标溶液的选择与配制：课题前期在进行内标物的选择的时候，分别考察了黄芩苷、槲皮素、芦丁和汉黄芩素进行了考察，仅槲皮素的保留时间和分离度达到要求，并且响应值和相同浓度的野黄芩苷镁盐相当，因此选用槲皮素作为内标物。在配制内标槲皮素溶液的过程中发现，用初始流动相配置的内标溶液及其不稳定，查阅文献，槲皮素属于类黄酮类物质，含有敏感基团，具有不稳定结构，易受光照等因素的影响而加速降解，其在甲醇溶液中较稳定[2-4]，所以配制内标溶液采用甲醇配置一系列溶液，放在4℃冰箱中避光保存。
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小结
本部分实验建立了专属性强、灵敏度高，重现性好的LC-MS/MS体内分析方法。通过比较分别经注射、口服和鼻腔给药后同等剂量的野黄芩苷镁在正常大鼠体内的主要药动学参数，可知将野黄芩苷镁制成原位凝胶，结合鼻腔给药，可显著提高生物利用度。
参考文献（略）