1.前言
1.1选题依据
睡眠是人类基本的生理需求，良好的睡眠可以促进机体迅速恢复体力和脑力，维持正常的生命节律。大强度的运动负荷对运动员来讲，是一种不良的刺激，运动员在训练和比赛过程中经常会出现失眠现象，称为运动性失眠。它是由运动训练或体育竞赛等相关因素所导致的失眠，引起运动员睡眠的时间缩短。它是导致运动性疲劳的主要原因，从而严重影响运动员的训练质量和运动成绩，还可能导致严重的运动损伤，并对运动员的身心健康造成很大影响
运动性失眠是失眠的一种特殊的类型。对运动员来说是一种不良的刺激，特别运动员在激烈紧张的比赛和大强度运动训练后，而运动性失眠的治疗又是运动员疲劳恢复中的瓶颈问题。失眠会局限运动员竞技水平的发挥和运动能力的发展，甚至出现运动损伤，从而对运动员的身心健康带来不利影响。引起运动性失眠的原因主要包括:心理性因素和生理性因素。有关研究证实运动性失眠的主要原因是情绪紧张、焦虑、剧烈的思想活动等心理性因素所致。然而运动员剧烈运动后，血压、脉搏、呼吸等一些生理指标的变化，同时在一定程度上对心理因素产生影响，共同导致运动性失眠。
目前有很多研究证明，运动性失眠的发生跟运动项目、性别、强度、等级以及年龄没有直按关系，从事运动训练就有可能导致运动性失眠的产生。石幼琪等人的研究表明，运动性失眠的发生率为60. 5%，高十普通人群，目_优秀运动员失眠持续的时间和频率很大程度上高十普通运动员，目_就占比例来说，属十暂时性的心理生理失眠为95%，属十持久性心理生理失眠为5%。就目前口趋激烈竞技比赛的来说，一方面对运动性疲劳的预防与恢复的瓶颈问题成为人们研究的焦点;另一方面也为运动员、教练员及运动医学工作者对运动性失眠的预防与治疗提供了参考。
目前为止，对动物失眠模型的研究比较多，常见的有:限制活动、水上平台法、电刺激法、强迫运动睡眠剥夺法和PCPA法等。但对十动物运动性失眠模型建立的研究较少，还没有建立一个完整的运动性失眠的动物模型，从而研究导致运动性失眠发生的生理生化机制、运动性失眠的各因素之间的相互联系和各个生化指标之间的相互影响。
综上所述，我们在以往研究运动性失眠大鼠的基础上，通过对不同方法建模进行比较，建立一个相对完整的运动性失眠大鼠的模型，这对以后运动性失眠建模将具有十分重要的意义。............
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2.实验研究
通过在现有的限制活动、水上平台法、电刺激法、强迫运动睡眠剥夺法、Y迷宫和PCPA法的基础上进行比较分析，做相应的预实验研究，从而得出实验的7个分组，对这7组大鼠进行相应的生理生化分析，最终建立相对完整的运动性失眠大鼠模型。
2.1实验对象与方法
神经递质的检测和检测方法国内外的报道有很多，主要有高效液相色谱电化学检测法(IIPLC-ECD，高效液相色谱荧光检测法(I IPLC-ELD )，柱前衍生液相色谱法，荧光分光光度计法，酶联免疫吸附法(EL工sA) ，气相色谱法(Gc)，气相色谱一质谱串联法(Gc-MS)，毛细管电泳法，液相色谱一质谱串联(Lc-MS)等。
本实验所测单胺类神经递质都具有天然荧光的特性，无需进行衍生化〔绷，因此采用高效液相色谱荧光检测法(IIPLC-ELD)来测定。IIPLC-ELD法是近几年迅速发展起来的一种分离分析法，操作简单快速，分离效率高，灵敏度高，检测限低，选择性好。测定时流速为1. 0 mL/min，流速太低时，色谱峰出峰时间太长，流速太高时，又会影响各色谱峰的分离。检测参数选择发射波长为330 nm，激发波长为280 nm，这样单胺类神经递质的检测灵敏度最高。
2.1.1实验对象
本实验选取健康雌性Wistar大鼠(由鲁抗集团动物饲养中心提供)85只，8周龄，体重230 g左右。分笼饲养，每笼5只，标准啮齿类饲料喂养，自由饮水、活动。动物房内保持安静，干燥，通风，室温23-28 0C，湿度40%-65%。动物适应性喂养1周，记录体重。
2.1.2实验分组
将大鼠随机分为7组:正常组、3%运动负荷(即负体重3%的重量游泳，以下相同)注射PCPA组(简称3%+PCPA组)、5%运动负荷注射PCPA组(简称5%+PCPA组)、7%运动负荷组(简称7%组)、7%运动负荷注射PCPA组(简称7%+PCPA) , Y型迷宫组(简称Y迷宫组)，Y型迷宫注射PCPA组(简称Y+PCPA组)，每组10只。
2.1 .3实验方法
对氯苯丙氨酸(PCPA)，由阿法埃莎(天津)化学有限公司生产，用量300mg/Kg，配成10%的浓度(即100mg/ml，大鼠用量3ml/kg)。由十对氯苯丙氨酸在溶液中溶解度较低，在弱碱性环境中溶解度增高。配成混悬液后，并滴注5%的OIIlOml, PCPA的溶解度增加，液体呈半透明状，4 0C保存备用。大鼠适应性喂养期间，每天进行20min适应性游泳，共6天，休息一天开始正式实验。实验开始第1周，除正常组外，3%+PCPA组、5%+PCPA组、7%+PCPA和7%组大鼠进行以下实验步骤。..................
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3实验结果................................................……......................10
3. 1大鼠体表特征的变化(表3)......................................……10
3. 2各组大鼠体重的变化(表4)......................................……11
3. 3各组大鼠摄食量的变化(表5)....... ..............................…11
3. 4各组大鼠血浆VE, DA含量的变化(表6)..........................12
4.分析与讨论..............................................….....................…13
4. 1不同干预对各组大鼠体表特征的影响..........................…13
4. 2不同干预对各大鼠体重、摄食量的影响(图4,图5)....……14
4. 3不同干预对大鼠血浆VE含量的影响.............................…15
4. 4不同干预对大鼠血浆DA含量的影响..............................…16
5.结论
本实验研究采用大负荷游泳训练(运动时间:90分钟，运动负荷:自身体重的7%) +腹腔注射PCPA所致的失眠大鼠模型，从大鼠外部体表特征、体重、食量和血浆单胺类神经递质VE和DA含量的变化特征分析，符合中医虚劳失眠症候，表明应用该方法建立失眠大鼠模型可行性较强，可广泛应用十运动失眠和临床方面的失眠基础研究。 目前有很多研究证明，运动性失眠的发生跟运动项目、性别、强度、等级以及年龄没有直接关系，从事运动训练就有可能导致运动性失眠的产生。石幼琪等人的研究表明，运动性失眠的发生率为oo. 5%，高十普通人群，优秀运动员失眠持续的时间和频率很大程度上高十普通运动员，目_就占比例来说，属十暂时性的心理生理失眠为95%，属十持久性心理生理失眠为5%。就目前口趋激烈竞技比赛的来说，一方面对运动性疲劳的预防与恢复的瓶颈问题成为人们研究的焦点;另一方面也为运动员、教练员及运动医学工作者对运动性失眠的预防与治疗提供了参考。
本实验研究采用大负荷游泳训练(运动时间:90分钟，运动负荷:自身体重的7%）+腹腔注射PCPA所致的失眠大鼠模型，从大鼠外部体表特征、体重、食量和血浆单胺类神经递质VE和DA含量的变化特征分析，符合中医虚劳失眠症候，表明应用该方法建立失眠大鼠模型可行性较强，可广泛应用十运动失眠和临床方面的失眠基础研究。