导语：接种HepB后仍有部分接种者乙肝病毒表面抗体(Hepatitis B surface antibody,抗-HBs)滴度呈现低/无应答状态,低/无应答人群在暴露后仍然易感染HBV并可能转化成慢性携带者。我国以新生儿为主要免疫接种对象,采用简便有效的方法提高低/无应答新生儿抗-HBs应答水平是多年来研究者关注的焦点,也是在疫苗应用中亟待解决的问题。因此本研究通过对HepB基础免疫后低/无应答新生儿再免疫3剂HepB进行免疫效果分析,为提高新生儿抗-HBs应答水平的相关策略提供参考依据。由本站硕士论文中心整理。
背景
乙型病毒性肝炎(乙肝)由乙肝病毒 (HePatitisBVirus，HBv)引起的全球性传染病，全世界乙肝病毒表面抗原 (HePatitisBsurfaceantigen，HBsAg)携带者约有3亿，亚洲2亿多[l]。我国属于HBv高流行地区， 1992年全国病毒性肝炎血清流行病学调查显示，全人群HBsAg携带率为9.75%，HBv总感染率为57.63%，据此估算全国HBv感染人数>7亿[2l，长期HBsAg携带者 1.2亿，占全球乙肝携带者的1/3，后者约25%最终将转化成慢性肝病，包括肝硬化和原发性肝细胞癌 (Hepatoeellulareareinoma，HCe)。原发性Hee中50%由于HBV感染导致，HBV的致癌作用仅次于人类已知致癌物中的烟草l3]。估计中国每年约有26.3万人死于与乙肝相关的肝脏癌症或肝硬化，占全球乙肝相关总死亡的37.50%。
HBv感染对患者本人、家庭和社会造成严重的经济负担，按照2001年人均国内生产总值(GDP)估算乙肝造成的总经济损失高达586.29亿~1077.97亿元。我国人群中约35%~40%HBsAg携带者是由母婴围产期传播引起的。据文献报道，HBsAg阳性和乙肝病毒e抗原 (HepatitisBeantigen，HBeAg)阴性者母亲传HBV给新生儿的)L率为700，0一80%，HBsAg和HBeAg同时阳性的母亲传HBv给新生儿的几率可达95%[4]，且新生儿感染HBV后，90%~95%发展成慢性HBv携带状态[sl。乙肝疫苗 (HePatitisBvaccine，HePB)接种是预防乙肝的有效途径，是阻断HBV母婴传播的最佳手段。越早接种HePB，就越早预防HBV的感染。台湾地区和广西壮族自治区隆安县队列研究表明，接种HePB不仅可预防乙肝，也可以预防由HBv感染引起的肝硬化和原发性HCC。
由于T型肝炎(丁肝)病毒 (HepatitisDvirus，HDV)必须在HBv感染的基础上才能感染，所以接种H叩B还可预防丁肝I6]。我国卫生部于1992年将HePB纳入计划免疫管理，对所有新生儿按。，1，6个月程序接种3剂HePB，自2005年6月旧起改为全部免费接种。2006年1月发布了《2006一2010年全国乙型病毒性肝炎防治规划》，明确我国HepB接种对象是新生儿，其次为幼儿和高危人群[v]。2006年我国开展乙肝血清流行病学调查，结果显示，我国儿童HBV感染率明显下降，而成人的HBsAg阳性率仍然维持在很高的水平[8]，说明H叩B在预防儿童感染HBv方面发挥了很好的作用。尽管全球现有上市的重组HePB(酵母)己经取得了较大的改善并获得了较好的免疫效果，但仍有1%~10%的健康成人和新生儿不能产生乙肝病毒表面抗体 (HepatitisBsurraceantibod%抗一HBS)19一川。新生儿HepB免疫三针后l一6月经检测抗一HBs滴度 )1omIU/ml才表示抗体阳性，抗一HBs滴度在 1omIU/ml一99mIU/ml，定义为低应答;抗一HBS滴度 <1OmIU/ml的定义为无应答[’2]。低/无应答人群在暴露后仍然易感染HBV并可能转化成慢性携带者，有研究建议成人在全程接种3剂HePB后l一3个月检测抗.HBs滴度水平。’l。
如果无应答者在暴露后，仍易感染HBv，建议再免疫3剂HePB并联合接种HBIG[，4]。另外， JackAD研究中发现抗一HBs滴度<loomIU/ml儿童与无应答儿童具有同样的危险感染HBVI，5]。抗一HBs滴度10m1U/ml值是大家都公认的具有免疫保护性的闭值，但是10m1U/ml只是一个临界值，只是相对可能具有保护性。欧洲一些卫生机构推荐100mIU/ml作为HePB抗一HBs保护性的临界值，他们认为<loomIU/ml都有较高的危险感染HBvl’6一，71。在我国很少有学者使用这种标准，而且对低应答人群研究较少，本研究将对低应答人群进行分析。我国新生儿免疫规划疫苗主要应用5陀剂型的重组HePB(酵母)，其近期保护效果己经研究和应用证实。然而接种疫苗后仍有部分接种者的抗一HBs呈现无应答状态，采用简便有效方法使抗体阳转是多年来研究者关注的焦点，也是在疫苗应用中垦待解决的问题。特别是我国以新生儿为主要免疫对象，这一问题尤显突出。
影响HePB免疫接种效果因素除了宿主免疫反应外，还与HepB的种类、剂量、针次和首针(HePB，)是否及时等均有关。国外文献报道在提高HePB低/无应答研究中发现含有CpG基序的脱氧寡核普酸(cpG一oPN)作为佐剂的或含有前s基因[201的HePB可以提高抗体水平。国内学者在证实了CpG一OPN作为佐剂的作用外，还研究发现CpG•OPN纳米粒作为佐剂在提高无应答者的抗一HBs的阳性率更有效。另有学者发现对于在多次接种HePB后，仍为无免疫应答的成人中应用甲乙肝联合疫苗可以提高抗体阳性率[22]。有学者研究发现接种重组HePB(汉逊酵母)苗10林g，其抗一HBs阳性率成人要优于新生儿。还有研究发现重组HePB(汉逊酵母)和重组HePB(酵母)疫苗在新生儿免疫接种后其抗一HBs阳性率与滴度差异无统计学显著性[23]。刘崇柏等研究表明接种大剂量HePB所产生的抗一HBs阳性率要优于小剂量[2’]。还有学者认为大剂量抗原能引起T细胞和B细胞耐受，而导致低/无应答125]。美国研究表明新生儿出生体重<17009的儿童由于接种后低/无应答率高而需要延迟接种HepBI口6J。
有研究表明，新生儿越早接种HePB，应答效果越好l2v]。而且HePBI未能实现及时接种造成了部分新生儿的低/无应答。个别报道也指出，新生儿HePB抗.HBs滴度无婴幼儿和青少年高，怀疑与新生儿免疫系统尚未完成发育成熟有关1281。在细胞免疫方面，国内外研究结果均表明HePB低/无应答与白细胞介素(Intedeukin，IL)的含量有关系[29]。T细胞的增殖与分化依赖于IL一2和IL一6及其受体的产生和结合，而且IL一2可促进B细胞增殖，IL一6可促进B细胞分化为能产生抗体的浆细胞。IL一2和IL一6在HePB在机体内的免疫应答发挥着重要的作用。有研究发现IL一2的量和HePB应答存在着正相关关系130]，但这种正相关关系是否是IL一2和IL一6的共同的作用引起的结果有待进一步研究，IL一2和IL一6在低应答的含量是否与无应答组和应答组存在差异，现在还尚未定论。
参考文献：
[1] Shokrgozar MA,Shokri F. Enumeration of HBsAg-specific B-lymphocytes in Iranian healthy adult responders and nonresponders vaccinated with recombinant hepatitis B vaccine .Immunology, 2001, 104 :75-79 .
[2] Münci Ya?c?,Kadir Acar,Gülsan Türk?z Sucak,Kadri Yama?,Rauf Haznedar,et al. Hepatitis B virus vaccine in lymphoprolifera-tive disorders:a prospective randomized study evalutating the efficacy of granulocyte-macrophage colony stimulating factor as a vaccine adjuvant .European Journal of Haematology, 2007, 79 (4) :292-296 .
[3] Genevieve Al,Steven SW. Hepatitis B Vaccination of Premature Infants:A Reassessment of Current Recommendations for Delayed Immunization .www.pediatrics.org. 2007, .
[4] Immunization summary .2009, .
[5] Becutels P. Economic evaluations of hepatitis B immunization:a global review of recent studies(1994-2000) .Health Econ, 2001, 10 (8) :751-774 .
[6] 郭慧平,徐岷,王玉萍. 乙肝疫苗免疫应答低下患者20例血清HBVDNA检测[J]. 河南医科大学学报, 1997,(04) .
[7] 孔令斌,安锐,林立,杨志寅. 乙肝疫苗接种后无弱应答者发生的分子生物学机制(英文)[J]. 济宁医学院学报, 2007,(01) .
[8] 韦颖华,吴继周. 乙肝疫苗免疫应答与主要组只相容性抗原(MHC)表达关系的研究进展[J]. 内科, 2007,(01) .
[9] 滕华聚,尹世云. 接种乙肝疫苗后无/弱应答及其影响因素分析[J]. 社区医学杂志, 2006,(19) .
[10] 沈宝荣. 接种乙型肝炎疫苗无应答儿童复种后5年效果观察[J]. 社区医学杂志, 2007,(07) .
[11] 姚伟,李玉,任魁,张岩锐,范临兰,郑菊梅. APS作为重组(CHO细胞)乙型肝炎疫苗佐剂的安全性及免疫效果[J]. 中国生物制品学杂志, 2002,(04) .
[12] 刘华章,黄桂花,曹庆,章达明,闻书英. 成人乙型肝炎疫苗多次免疫无应答者再接种甲乙型肝炎联合疫苗的免疫效果[J]. 中国生物制品学杂志, 2007,(02) .
[13] 王继杰,颜天强,罗述斌,李乔生,李述智,曹惠霖,刘崇柏,夏国良. 新生儿乙肝疫苗免疫后15年效果观察[J]. 实用预防医学, 2000,(06) .
[14] 张宪忠,朱文,杨洪生. 100例乙肝疫苗无应答原因分析[J]. 现代预防医学, 2002,(04) .
[15] 孔令斌,王学良,徐慧文,刘蓬勃,庄贵华,左弘. 乙肝疫苗接种无弱应答与遗传因素关系的研究[J]. 现代预防医学, 1997,(02) .
目录：
中文摘要 6-8
英文摘要 8-10
背景 11-14
研究目的 14-15
技术路线 15-16
材料与方法 16-22
1 研究地点 16
2 研究对象 16-17
3 样本量计算 17
4 研究材料 17
5 免疫程序及接种方法 17-18
6 研究方法与内容 18-20
7 数据统计与处理 20-21
8 质量控制 21-22
研究结果 22-55
第一部分 研究对象一般情况分析 22-24
第二部分 新生儿基础免疫分析 24-36
第三部分 乙型肝炎疫苗再免疫结果分析 36-55
讨论 55-60
.......
1 未进行细胞免疫学检测 60
2 未对再免疫3剂后低/无答人群进行HBV-DNA检测 60
3 失访过多、随访样本过少 60
4 需要进一步开展的研究 60-61
结论 61-62
参考文献 62-67
附录 67-69
致谢 69-70
综述 70-79
个人简历 79
您可能有预防医学论文方面的购买需求，请到预防医学论文频道选取：