1绪论
1.1研究背景
五角枫C4cer mow Maxim),属于槭树科,槭树属树种,别号色木槭。五角枫属落叶乔木,其叶片基部呈心形或浅心形,通常5裂,裂片重要呈卵状的三角形,全缘。叶片色彩为黄绿色,为伞房花序,其果核的外形为扁平状或许微隆起状,果翅开展后呈钝角。在华北、西南各省五角枫散布普遍,是我国槭树科树种中散布面积最为普遍的一个树种。在冬季,其具备旺盛稠密的绿叶,春季因为气象的起因,落叶时光个别很晚,尤其是进入深秋,其叶片的色彩变成橙黄色或许白色,从远处观看象一团"火",是南方非常重要的一种叶树种。一方面它可做行道树,庭荫树,另一方面也能够做灌木栽植。其姿势洒脱、枝干挺秀,树形非常幽美,在园林绿化以及用材方面被普遍运用。此外,从中提取的杨梅素,神经酸,活性单宁,绿原酸以及黄酮等各种活性物资,在化工染料、医药保健以及轻工酿等行业得到了非常普遍的运用。五角枫虽可用于收获或扦插滋生,但其传统收获滋生,周期长,滋生系数低,且轻易发作变异;再加上其扦插滋生成活率低,这一技巧上的难题始终没有处理。从而招致五角枫优劣种苗的价钱在市场上始终处于高位运行,没有降落的趋向。因而,在林木产业中,五角枫的快繁技巧的有效处理已成为事不宜迟。目前,五角枫组织造就方面的报道绝对较少,尤其是五角枫体细胞胚发作以及植株再生方面的钻研海内依然没有进行过。因而,是否通过动物组织造就完成五角枫的少量、疾速的滋生须要进行详尽的钻研。
1.2五角枫生物学特性和种质资源的研究
1.2.1五角枫生理方面的研究
当前种子繁殖是五角枫一个主要的繁殖方式,观察和研究了五角枫幼果发育和开花习性,有助于了解五角枫。高风华(2009)研究发现在同样的小气候下,不同株间花期物候特征差距大概4-6 d,其所需10 'C及以上的有效积温也存在着非常明显差异,这是由于遗传差异造成的;但是花期差异较小,约为15-16 do五角枫花具有雄蕊仲长型和雌蕊伸长型两种类型形态构造,以及三个开放时间。作为雌雄异熟的植物,五角枫表现出相互交叉授粉和繁殖性状的性别分工(Shibata等,2009)。多元回归分析表明,父母本花粉繁殖成功明显的随着花的生产和相互开花时间同歩性的增加而增力口,随着交配距离的减少而略有增加(Kikuchi等,2005)。作为一种重要的园林绿化树种,五角讽的栽培密度严重影响其生长情况以及叶片的颜色,从而对其绿化观赏价值产生很大的影响。因此选择合适的栽培密度具有重要的意义。黄云鹏(2010)进行了不同密度对五角枫二年生苗色素含量与生长的影响方面的研究,发现密度为120万株/hm2苗高最大,90万株/hm2的第二,而150和60万株/hin2的苗的具有最小高度;鉴于苗木的生长状况,120万株/hm2的培育密度为最佳密度,而从苗木的变色效果来看,则150万株/hm2的培育密度为选择密度。
1.2.2五角枫的抗逆性
研究大量的实践和理论研究发现,五角枫在抗逆方面具有多种优势,例如抗旱、耐寒、耐瘠、抗逆性强等方面。当前,我国的水资源严重匮乏,为保证农林业健康持续发展,发展抗旱节水种植已经成为一个重要的方向。五角枫在抗旱方面的研究以为许多专家学者所证实,通过对五角枫、刺槐以及金银木的研究,发现在3树种中五角枫具有最低的叶片清晨叶水势、水势平均值、平均蒸腾速率、气孔导度,这暗示着同等条件下,五角枫受外界条件变化的影响最小,其蒸腾耗水量最小,具有最强的抗旱性。叶片临界饱和亏和保水能力由大到小依次为五角枫、刺槐、金银木。说明了五角枫的具有最强的抗脱水能力,当水分严重缺乏时,其需水量最小(王贵霞等,2003)。导管作为输送营养以及水分的重要组织,研究其基本特性有助于认识五角枫的抗旱机制。植物的可塑性对于其适应外界环境、完成自身生长具有重要的作用,研究五角枫可塑性相关指标有助于加强对环境适应能力的认识。冯蕾等(2008)研究了 NaCl胁迫对流苏和色木槭膜脂过氧化和抗氧化酶活性的作用,发现叶片DA含量、质膜透性随盐浓度的升高,呈上升趋势,其中流苏的MDA含量与膜透性具有较大的升高幅度,其受盐害相对较重。同时,随盐浓度的不断升高,POD活性呈先上升后下降的趋势,SOD的活性呈上升趋势,色木槭升高幅度都高于流苏。可以推测,流苏耐盐性相对较弱,色木槭具有较强的耐盐性,艽耐盐性与其具有较强的抗氧化酶活性有关。
1.2.3栽培管理技术
进展五角枫应用价值大,合理的栽培管理措施有助于其生长,有助于发挥其价值。研究发现五角枫种子当年9月份即可成熟,在第二年春天进行播种,苗期管理技术主要包括控制水肥、病虫害防治以及清除杂草(张素会和李伟,2006)。作为一种重要的造林树种,目前五角枫己经在许多地方的造林工程中发挥着作用。研究发现ABT和保水剂对五角枫的造林成活率具有促进作用,并达到极显著水平(秦飞,2009)。王峰等(2010)对三个华北五角枫的嫩枝扦插生根技术进行了研究,发现三个品种的生根率存在着很大的差异。在6月上旬以当年生枝条为插穗,其上面保留叶2片,下切口斜切上切口平切,1000 mg-kg-lNAA蘸20 s后扦插到洁净的河沙中,生根会出现最佳情况。张凤翔和纪魔翔(2011)研究了五角枫苗木培育技术,指出采种母树以品质优良的壮年植株为宜,在秋季翅果从绿色变成黄褐色时进行采集,采的种子需要凉晒大约2-3d,除去杂质后再进行干藏。种子催芽通过中等温度的水浸催芽,催芽之后30%的种子裂口露白的时候,就可进行播种。此外,杨会(2004)、田野等(2010)、张成福(2011)、何猛(2011)、 丁继红和张江涛(2011)、扎拉根白乙拉等(2011)、杨国祥(2011)等学者对各地五角枫育苗技术进行了研究。
1.2.4五角枫应用研究
进展当前,我国水资源匮乏,因此,发展抗旱的木本农业已经成为一个趋势。在非常干旱的地方应用五角枫进行造林,与其他树种相比,其具有非常明显的成活能力。沈祥侠等(2010)研究发现水浸泡处理能显著提高五角枫干旱地造林成活率,并且对后期生长也具有很大提高,促进了苗木提前成形。五角枫树木生长量达到苗圃地里面的生长标准,而且成本低廉、推广简单、效果显著等。赵宗林通过在陕西陇县北部山区进行试验,发现五角枫的造林成活率与刺相差很小,而明显高于油松、核桃、山杏、侧柏等树种,在不同条件下它们的造林成活率存在差异,但五角枫的成活率明显高于其他树种。因此,五角枫在我国北方,尤其是西北地区,是具有发展前途的造林树种。郭天亮等(2003)对五角枫防火林带营造技术进行研究,在豫北林州地区将其作为生物防火林带树种,进行防火林带营造,并对其防火林带的分布与设置、营造技术进行试验研究。发现其林带具有较好的防火效果,对豫北太行山地区来说,五角枫生物防火林带工程建设具有重要的实践意义。刘英(2003)对五角枫果实加工的丌发利用进行了综述,目前,在五角枫方面的研究系较多,巳对五角枫果实油脂提取工艺进行了改进,生产出活性高的五角枫单宁, '生产出优质的食用油,以及用低温高效法进行提取五角枫拷胶的工艺,系统的生药学研究也已开展,取得了明显的成效。五角枫也从传统的较为单一的绿化以及观赏树种,转化为化工、油料、药用以及靴料等多用途的经济树种。近年来,五角枫在城市环境绿化和景观中得到了应用(徐斌和胡波,2004),在韩国民间,五角枫叶片用来治疗多种疾病,此外,还可以开发营养调和油、保健食品以及营养强化剂(刘利,2007)
1.3植物组织培养研究进展
1.3.1国外植物组织培养研究进展
1.3.1.1国外植物组培简介
植物组织培养(Plant tissue culture)是指在无菌的条件下,将离体的植物器官(花、种子、果实、叶、茎、根等)、组织(皮层、形成层、胚乳、花药组织等)、细胞(体细胞与生殖细胞)以及原生质体,在培养基上进行培养,选择适当的培养条件加以控制,使其长成完整植株的过程。因为是对脱离植物母体的培养物进行培养,所以又叫做离体培养(Culture in vitro)。
目录
2五角枫种了和外植体....................................15
2.1材料方法.................................... 15
2.1.1试验材料.................................... 15
2.1.2试剂与仪器.................................... 15
3 角枫组织脱分化的研究.................................... 22
3.1材料1f方法.................................... 22
3.1.1五角枫种了的消毒与火菌.................................... 22
3.1.2五角枫无菌苗的获将.................................... 23
4五角枫组织培养器官再生能力的研究.................................... 27
4.1材料与方法.................................... 27
4.1.1无菌体系的建立.................................... 27
4.1.2五角枫组织脱分化及.................................... 27
4.1.3器官发生.................................... 28
结论
1.1本研究发现与升汞相比,利用次氯酸钠对五角枫外植体进行消毒,可有效控制微生物的污染,易于获得无菌外植体并且利于其生长。五角枫外植体芽和种子的最佳消毒条件为NaCIO浓度为0.8%,消毒时间为25 min。
1.2通过对外植体材料的研究看出,五角枫愈伤组织诱导中以幼叶为最佳诱导材料。通过对三种激素的研究发现,五角枫外植体愈伤组织高效诱导的最优组合是6-BA浓度以0.5mg/L,2, 4-D浓度以1.0mg/L, NAA浓度以0.5 mg/L。此外,通过正交试验结果的极差和方差分析发现,外植体和三种激素对五角枫愈伤组织诱导影响的主次关系为:D (外植体)>B (6-BA浓度)>C (2, 4-D浓度)>A (NAA浓度)。
1.3外源生长调节物在愈伤的增殖的作用影响大小依次为:6-BA、2, 4-D. NAA.TDZo因此在这四种外源生长调节物中6-BA是对五角枫愈伤组织的增殖影响最大的因素,其用量的差异会显著影响愈伤诱导率。对于五角枫愈伤组织的增殖;A、 B、 C、D4个因素的最佳水平组合为AiB3C2D3,即:6-BA浓度以1.0 mg/L, 2, 4-D浓度以0.5 mg/L, NAA浓度以0.5 mg/L. TDZ浓度以1.5 mg/L为最佳。
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