导语：高氟可致甲状腺功能损害,形态损伤,本研究探讨高氟致亲代大鼠甲状腺损害后是否对子代大鼠甲状腺产生损害及探讨可能的损害机制。由本站硕士论文中心整理。
前言
氟中毒是一种全身性疾病，过量的摄入氟几乎对机体所有器官和组织均产生毒害作用[1]。有资料报道[2]，甲状腺是对氟最敏感的器官。影响甲状腺的最低氟阈值为0．5 mg/（kg．bw．d）。研究已经证实[3]：高氟能明显地影响甲状腺摄取和聚集碘的能力，在此基础上影响整个甲状腺的结构和功能，造成甲状腺功能低减、甲状腺形态结构损害。
我们前期的实验结果也证实了此结论[4]。高氟不但可造成机体多方面的损害，还能够通过胎盘和乳汁进入胎儿体内直接影响胎儿[5，6]。胎儿甲状腺在妊娠70d开始碘浓缩及碘化酪氨酸合成，在妊娠17周可见甲状腺腺体结构。妊娠期染氟可影响胎儿甲状腺的分化发育、甲状腺激素的合成。目前有报道[7]氟病区胎儿甲状腺滤泡上皮细胞线粒体肿胀，严重者甚至出现线粒体崩解；动物实验发现长期摄入高氟对胎鼠甲状腺发育有影响[8]。
还有报道指出[9]，甲状腺在受到短期高氟作用后，脱离高氟的影响，甲状腺的功能和形态可能恢复正常。但关于高氟对子代甲状腺功能及甲状腺形态结构的影响相关报道尚少见。观察、研究子代脱离高氟环境生长发育至成年后，甲状腺的功能和形态是否能够恢复正常，对指导氟中毒防治原则的确立和明确具体防治措施都是重要的。近年来，谷氨酸受体（Glutamate receptors,GluRs）在创伤或中毒后的组织损伤中所扮演的重要角色越来越受到关注，其通过兴奋性毒性引发一系列的损伤反应。已知谷氨酸受体在大多外周组织均存在，性腺、胰腺、垂体、松果体、肾和肾上腺等内分泌组织也有GluRs分布[10]。
实验证明，GluRs无论在中枢神经系统还是在周围组织都具有相同特性[11]：与谷氨酸（Glutamate，Glu）结合传递信息，在效应细胞引起特定的功能改变或电位变化。在内分泌组织GluRs可能参与调节激素的分泌，介导激素的释放，从而对机体代谢及功能发挥调控作用[12]。甲状腺是人体内最大的内分泌腺，甲状腺中是否存在GluRs，GluRs在高氟所致的甲状腺组织中表达有无改变及可能的意义，目前国内外未见研究报道。而对此展开研究显然也是有意义的，因为其可能构成氟中毒致组织损伤的重要机理。
正文1．实验材料：
1．1实验动物：
清洁级10周龄Wistar大鼠30只，体重200±20g，由贵阳医学院实验动物中心提供。
1．2主要实验试剂：
氟化钠（重庆试剂厂，分析纯）TT3、TT4试剂盒（北京原子能生物技术研究所）NR2B抗体（博士德公司）生物素化山羊抗兔IgG（博士德公司)DAB显色剂（博士德公司)
1．3实验溶液的配制：
0.1M PBS缓冲液：1000ml双蒸水，加入Nacl 18g，Na2HPO4•12H2O 12g，NaH2PO4•2H2O 0.8g，PH值7.2-7.4。0.01M柠檬酸盐缓冲液：2000ml双蒸水，加入柠檬酸三钠3.0g，柠檬酸0.4g，PH值6.0-6.2。中性福尔马林固定液：40%甲醛100ml，磷酸二氢钠3.5g，磷酸氢二钠6.5g，加蒸馏水900ml，PH值7.0。1．4主要实验器材：精密电子天平(上海医用激光仪器厂)101-2B型内热恒温鼓风干燥箱（上海路达实验仪器有限公司）LEICA切片机(RM2135德国)奥林巴斯显微镜(BH2日本)Biomias2001图象分析系统（四川大学图象图形研究所）2．方法与结果：2．1动物分组：将30只Wistar大鼠随机分为两组：正常亲代组（N组）10只；高氟亲代组（F组）20只。两组大鼠分别雌雄交配产生子代大鼠，正常子代组为n组，高氟子代组为f组。
2．2造模方法：
大鼠于室温20℃-25℃喂养，实验前适应性喂养观察一周。正常亲代组（N组）饮用自来水，高氟亲代组（F组）饮用含NaF 100mg/L高氟水。7个月后随机抽取高氟亲代组大鼠检测TT
3、TT4，明确功能低减后，两组大鼠分别雌雄交配，一月后产子代大鼠。哺乳期间母鼠继续饮用高氟水，30天后母鼠与子鼠分笼；两组子代大鼠分笼后均饮用自来水，普通饲料喂养。待子代大鼠4月龄时杀鼠。2．3样本取材：（1）股动脉取血，3000rpm离心10分钟，分离血清，-20℃冻存，用于TT3、TT4测定。（2）大鼠断头处死，剥离甲状腺，移入中性福尔马林中固定48小时。常规石蜡包埋切片，厚度6μm。2．4观察指标及检测方法：2.4.1血清TT3、TT4检测：大鼠血清样品TT3、TT4测定由贵阳中医学院第一附属医院放射免疫实验室检测，实验操作参照试剂盒说明书进行。2.4.2 HE染色观察甲状腺组织形态：(1)石蜡切片的制作过程：①新鲜甲状腺组织迅速浸入盛有中性福尔马林(pH7.0)的EP管中，常温下置48h；②脱水：固定完成后，弃去固定液，
参考文献：
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