第 1 章 绪论
1.1 肝损伤的认知及治疗
1.1.1 肝损伤的认知
1.1.1.1 中医对肝损伤的认识
《素问•灵兰秘典论》陈述“肝者，将军之官，谋虑出焉”，反映出肝脏对人体的整体机能具有无可替代的作用。肝之疏泄不利，则五脏气机不畅，从中国传统医学角度看来，肝主疏泄，即为调节通顺身体气的运行；主藏血，为能够储存机体血液。各类肝病都是由疏泄情况有反常规、肝血濡氧功能障碍或肝脏阴阳失调导致。对此，中医也对肝病进行了系统的分类，包括肝郁、肝火、肝风、肝虚、肝厥、肝积等，其中多数肝病的发生皆以郁为中心，其他虚症、血症等特点穿插其中。因此对肝病的治疗需要采用辩证的思维，在不同的阶段应用不同的理论及处方。早在《皇帝内经》中就有肝病治疗方法理论的阐述，《素问•藏气法时论》中，“肝苦急，急食甘以缓之”，“肝欲散，急食辛以散之，用辛补之，酸泻之”已有对肝病的救治记录要以甘缓，以辛散，以酸收，为后期医治肝病铺垫了基础理论。据赵旻[1]统计，在《临床指南医案》及《名医类案》中，甘味药在治疗肝病处方中使用频率均为最高，其中大多包括甘草、人参、阿胶、枸杞等药材。迄今为止，很多方药依旧广泛应用于临床治疗且有良好的疗效。
1.1.1.2 西医对肝损伤的认知
肝脏作为人体内不可或缺的器官中的一员，承担着参与代谢解毒、贮藏及调节血液和抵制抗原保护机体的责任。随着科技的发展及生活质量的提高，目前很多疾病泛滥，其中肝损伤也占据着很大的比重。沉浸在不良生活习惯及外界饱受污染的温床里，各种物理、化学、生物的危害源源不断攻击自身的机体，结果作为肝损伤的诱因数不胜数，如抽烟、过度饮酒、药物、毒物、睡眠不足、饮食不健康等。根据现有数据病例，可将肝损伤按照诱因及症状主要分为四大类，第一类为开放性肝损伤，包括贯穿或刺透肝脏引起的损伤，常伴有出血的症状；第二类为病理性肝损伤，多数体现在由病毒引起或者是肝脏癌症衍生而成的损害。大多伴有组织坏死，肝硬化就属于这一类别；第三类为闭合性肝损伤，归纳其发生原因主要为撞击，会产生肝实质出血的后果；第四类为化学性肝损伤，主要是有机物或金属引发中毒造成肝脏病理改变，比如有机农药中毒引起的肝损伤，还有常见的 DILI、酒精肝等。其中 DILI 正持续被全球关注，如常见的 AP、INH 和利福平，当然也不缺乏一些其他类药物如抗逆转录药物、调血脂药物等，尤其是随着中草药逐渐被应用到全球各国，研究数据发现多种中草药应用治疗后同样可能引发一定程度的肝功能障碍，且发病率逐年上升[2]。现今，对肝损伤的机制探究及病情救治仍有许多继续深入的空间，其发病率数据昭示着急需寻找更多对因对症治疗的手段及药物，因此探索更多的安全性大，疗效好，副作用小的治疗药物仍是当务之急。
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1.2 鸦葱的研究现状
1.2.1 鸦葱的药学研究
1.2.1.1 鸦葱的形态特征及生长环境
鸦葱（Scorzonera austriaca Willd）属菊科，为多年生草本植物，常繁殖于中国中东部地区的山坡或是草地等区域。植物形态多高约 10cm 到 42cm，根部呈圆柱状，粗细不一，表面粗糙。茎较短，茎基被浓密的鞘状残异物包裹，基生叶呈线形或长椭圆形，顶端渐尖，茎生叶较少，呈鳞片状、披针形等，基部心形。叶片多为全缘，有的会出现微波状，表面光滑无毛。头状花序单生，总苞片 5层，花呈黄色舌状，两性。瘦果常无毛，有时也有微毛，冠毛为羽毛状。花果期因地理位置差异而略有不同，大都集中在 4-7 月份[53]。
鸦葱清理晾晒后，根部为长圆柱形，长度不小于 20cm，直径多在 6mm 以上。外观深棕至黑色，表面粗糙，其上端表现出稠密的横皱纹，而下端则是留有许多棕色细小根须。质较疏松，比较容易折断。气微，味微苦涩。根部所含物质有胆碱、橡胶、菊糖。叶则含有铬、铁、钴、镍、钙、镁等微量元素。鸦葱全草图如下。
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第 2 章 鸦葱提取物的制备工艺
2.1 实验材料
2.1.1 实验药材
实验中所用植物均采集于吉林省四平市，经吉林大学药学院生药学教研室张静敏教授鉴定为鸦葱。
2.1.2 实验仪器
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2.2 色谱系统及图谱
通过文献比对，发现鸦葱药材最佳提取方法为超声提取，提取效率高，并且不会因温度过高导致提取物变性。为获得鸦葱提取物的最佳制备工艺，以提取物含量、荭草苷含量及异荭草苷含量为评价指标进行单因素考察实验及响应面实验。 综合文献数据及实际情况，暂定单因素的考察内容分别为：提取时间范围在0.5h-3h 之间，乙醇浓度范围在 40%-80%之间，提取次数范围为 1-6 次，液料比范围为 10-20 倍。按照选定的条件对鸦葱药材超声提取，过滤得提取液，除去溶剂得鸦葱浸出物，上样 D101 大孔树脂柱，先用水淋洗除杂，再用 60%乙醇冲洗，回收 60%乙醇淋洗液，旋干，得到鸦葱提取物。
2.2.1 色谱系统
HPLC 的色谱条件： 色谱柱——Phenomenex Gemini 5μm C18 110A（250mm×4.6mm，5microm）； 流动相——A 为色谱乙腈，B 为 0.1%甲酸-纯净水； 流速——0.8ml•min-1； 柱温——30℃； 检测波长——337nm； 梯度洗脱程序如表 2.3 所示：
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第 3 章 鸦葱提取物质量标准的研究 ..................................... 29
3.1 常规检查 .......................................... 29
3.1.1 性状检查 .......................................... 29
3.1.2 水分检查 ................................. 29
第 4 章 鸦葱提取物的药效学研究 ................................... 39
4.1 实验材料 ................................ 39
4.1.1 实验动物 ......................................... 39
4.1.2 实验材料与试剂 ................................... 39
第 5 章 鸦葱提取物制剂（鸦葱胶囊）的制备及质量标准 .............. 45
5.1 鸦葱胶囊的成型工艺研究 ................................ 45
5.1.1 润湿剂与粘合剂的选择 ............................. 45
5.1.2 休止角 ............................................... 45
第 6 章 鸦葱胶囊的稳定性研究
6.2 考察方法
6.2.1 影响因素试验
6.2.1.1 试验方法
高温试验：取同一批鸦葱胶囊置恒温恒湿箱内，60℃放 10 天，分别于 5 天、10 天末取样检查各项指标。
高湿试验：取同一批鸦葱胶囊置恒温恒湿箱内，于 25℃、RH90%条件下放置 10 天，分别于 5 天、10 天末取样检查各项指标。
光照试验：取同一批鸦葱胶囊置恒温恒湿箱内，于照度 4500LX 条件下放置10 天，分别于 5 天、10 天末取样检查各项指标。
6.2.1.2 实验结果
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如表 6.1 所示，鸦葱胶囊内容物在高湿实验条件下性状改为黏连变黑，但是其特征化合物含量均符合胶囊标示量。因此说明内容物在高温、高湿、强光照射的条件下成分稳定，但是为保证外观良好，需将条件控制在干燥情况下生产贮存。
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第 7 章 结论
鸦葱提取物具有显著保肝的功效，实验室在前期研究中，分别在鸦葱粗提物、鸦葱精提物对急性肝损伤的保护作用方面做了相关的体外及体内的详细研究，目前还没有包含鸦葱提取物作为主要成分的任何剂型药品上市应用，所以本次实验旨在研究鸦葱提取物的制备工艺以及其对小鼠急性肝损伤的保护作用，并对提取物进行质量标准建立；此外还有鸦葱胶囊制备工艺的探索，并对成型的鸦葱胶囊同样建立质量标准。实验总结如下：
1.将新鲜的鸦葱去土，晒干后，首先对干燥鸦葱进行单因素考察实验，考察因素分别为提取时间、提取次数、液料比及乙醇浓度，找到较好的条件进行响应面实验，以提取物含量及两个单体的质量作为指标筛选出最优提取条件，优化制备工艺，最终筛选出的工艺为：将干燥鸦葱浸入 18 倍 60%的乙醇溶液中，超声提取 3 次，每次 2h。所得物浓缩去醇，之后上样于 D101 大孔树脂除去色素，得到鸦葱提取物。
2.对所得鸦葱提取物建立相应的质量标准，确保其质量。首先按照 2020 版《中国药典》的相应的检测方法对鸦葱提取物进行包含性状、水分、灰分的常规检查。筛选出效果良好的薄层层析分析条件，对鸦葱提取物进行薄层鉴别，其显色斑点位置包含阳性对照。建立了鸦葱提取物中两个单体的含量测定的方法，并对该方法实施方法学考察，结果显示两个单体化合物在一定浓度内线性关系良好，且具有良好的精密度、稳定性及重复性，加样回收率也在合理区间范围内，表示HPLC 法能够准确测定鸦葱中成分的含量，具有很好的参考价值。
3.为了测定鸦葱提取物具有保肝功效，对鸦葱提取物进行了药效学考察。实验结果表明，针对 CCl4诱导的小鼠急性肝损伤模型，鸦葱提取物低、中、高三个剂量组均可降低小鼠血清中的 AST、ALT、LDH 的含量，其中低剂量组已有作用，而中、高剂量组作用明显。此外，肝组织病理切片结果显示，鸦葱提取物剂量组对小鼠肝脏组织具有改善作用，能够减缓肝细胞坏死。因此鸦葱确实具有明显的保肝作用。
参考文献（略）