第一章前言
炎症和疼痛是机体最常见的病理症状。炎症是具有血管系统的活体组织对损伤因子所产生的防御反应，其局部的临床症状是红、肿、痛和功能障碍。可见，疼痛是炎症发展到一定阶段的必然病理反应，另外某些致炎物质如缓激肽、PEG等本身也是致痛物质。因此，可以说炎症反应是机体对损伤性刺激最原始的保护性反应，是最基本的病理过程，也是许多不同类型疾病的共同病理基础。目前临床上用于抑制炎症反应的药物种类较多。主要有非甾体抗炎免疫药（Nonsteroidal antiinflammatory-immunity drugs,NSAIIDs）、甾体抗炎免疫药（Steroidal antiiflammatory-immunity drugs,SAIIDs）和疾病调修药（Discase-modifying drugs,DMDs）。非甾体抗炎药可抑制环氧酶的活性，阻断体内花生四烯酸形成前列腺素的过程，抑制前列腺素的生物合成，对控制风湿及类风湿性关节炎的症状有肯定疗效，但不能根治，也不能防止疾病的发展及并发症的发生。甾体类抗炎免疫药主要是指糖皮质激素类甾体，这类药物具有强大的抗炎作用，通过激活特异的糖皮质激素受体和促使生成抗炎性多肽对抗多种原因引起的炎症。但是长期大量的应用该类药物会引起许多不良的反应，如类肾上腺素皮质功能亢进综合症等。疾病调修药主要包括免疫增强剂、免疫抑制剂和免疫调节剂。中药中许多糖类、甙类和生物碱类等活性成分可影响炎症免疫反应。因此，近年来从中药中寻找毒副作用较小的新天然抗炎药物并进行有效成分的探索日益受到重视，成为研究的热点。
近二十多年来，我国抗炎药理学，特别是抗炎中药研究有很大发展，研制出雷公藤、昆明山海棠等许多抗炎中药及其复方，并对许多传统的祛风湿药，清热解表药进行了深入的抗炎药理学研究。实验方法不断增加、更新，水平不断提高。
抗炎作用的研究方法很多，在进行抗炎实验时，需根据中医药学理论，建立相应的病、症、证结合的病理模型，才能防止抗炎药研究中假阳性结果的出现。无菌性炎症(或称非特异性反应)是用多种致炎因子于动物体内或体外引起炎症或其某个阶段的细胞组织反应。一般炎症模型均属非特异性，针对炎症过程发展的三个阶段，设计三个方面的动物模型：（1）以增加血管通透性为主要改变的各种急性炎症模型（如测定血浆蛋白渗出量、肿胀度等）；（2）以白细胞游走为主要指标的白细胞趋化性炎症模型；（3）以肉芽肿组织增生为特征的各种慢性炎症模型。
（一）第一炎症时相动物模型在中药研究中的应用
炎症早期的主要表现是毛细血管扩张、通透性亢进、渗出和水肿，许多致炎剂及注射有一定刺激性的异物于特定部位均可产生上述反应。
（1）炎性肿胀模型的应用
因致炎部位的不同，可以分为足肿胀和耳廓水肿模型[21]。足肿胀模型的常用致炎剂有角叉菜胶、新鲜鸡蛋清、甲醛、右旋糖酐、酵母、组胺、白陶土、琼脂、缓激肽以及5－HT、PGE2等。而小鼠耳廓水肿的常用致炎剂有二甲苯或巴豆油合剂（含2％巴豆油，5％蒸馏水，20％无水乙醇及73％乙醚）。
（2）毛细血管通透性模型的应用
当致炎因子诱导毛细血管通透性增高时，染料Evans blue与血浆蛋白的结合物将渗出，用比色法或荧光法定量测定染料量，在一定程度上反映血浆蛋白的渗出量。
（二）第二炎症时相动物模型在中药研究中的应用
胸膜炎模型不仅可检测白细胞的游走和分泌功能，也可反映血管通透性的变化，常采用角叉菜胶或醋酸造模，可测渗出液中白细胞的含量，也可测PG、组胺、5-HT、缓激肽等的含量。
(三）肉芽肿模型在中药研究中的作用
炎症晚期以纤维组织增生、肉芽屏障形成等为特点。肉芽肿模型主要诱导产生与临床某些炎症后期病理变化相似的肉芽增生，致炎剂为不同性质的异物，如无菌的棉球、塑料环、滤纸片、琼脂等，大鼠巴豆油性肉芽囊法中测定囊壁重量可表示炎性屏障形成能力。
近年来，随着中草药研究的不断扩展及深入，中药的作用研究与西药药理从某些方面殊途同归，进而阐述出了中药的作用机理。一些中药之补益药在此类研究中突出了强体、抗衰老、抗疲劳之作用，归之为中药的抗氧化作用。
综上所述，中药因其抗氧化作用明显，受到临床重视，制剂品种多样，效果明显，其许多制剂更是成为中老年患者的必备之药，有助于提高机体生命效率，即延长生存时间，提高生命活力。
第二章鼠妇镇痛成分的分离和提取....................................................17
2.1实验材料与仪器....................................................................................17
2.2实验方法................................................................................................19
2.3实验结果与分析....................................................................................27
2.4本章小结.................................................................................................34
第三章鼠妇醇提物的毒性实验研究..................................................35
3.1实验材料与仪器....................................................................................35
3.2实验方法................................................................................................35
3.3实验结果与分析....................................................................................36
3.4本章小结................................................................................................37
第四章鼠妇醇提物镇痛作用的研究...................................................38
4.1实验材料与仪器....................................................................................38
4.2实验方法................................................................................................39
4.3实验结果与分析....................................................................................41
4.4本章小结................................................................................................49
第五章鼠妇醇提物抗炎作用的研究.....................................................50
5.1实验材料与仪器....................................................................................50
5.2实验方法................................................................................................50
5.3实验结果与分析....................................................................................51
5.4本章小结................................................................................................55
第六章鼠妇醇提物的抗氧化活性.......................................................57
6.1实验材料与仪器....................................................................................57
6.2实验方法................................................................................................58
6.4本章小结................................................................................................63
第七章结论及展望...............................................................................64
参考文献..............................................................................................67
第七章结论及展望
7.1结论
中药在预防疾病、治疗疾病、保护人民健康方面发挥着重要的作用。迄今为止鼠妇尚未被正式作为一种中药为中国药典或各地地方标准所收录。更未见国内外对其化学成分的报道。本论文研究鼠妇有效化学成分的分离、纯化及其抗炎镇痛方面的药理作用，并从鼠妇醇提物中分离纯化出有效成分D。得到实验结果如下：
（1）正交设计优选乙醇回流提取工艺确定最佳工艺为：5g鼠妇粉（20目）加20倍95％乙醇提取45min。验证实验表明该工艺重现性好，稳定可行。
（2）鼠妇醇提物毒性极低，昆明种小鼠灌胃给予鼠妇醇提物的最大给药量大于100g生药/kg（18g浸膏/mL），口服给药安全。
（3）鼠妇醇提物具有强效的镇痛作用，对大鼠甩尾，小鼠热板以及醋酸引致小鼠疼痛反应具有明显的镇痛疗效，大、中、小剂量均能减少小鼠扭体次数（p<0.05或p<0.01），延长小鼠热板的潜伏期（p<0.05或p<0.01）和大鼠的痛阈值。
（4）鼠妇醇提物萃取后得到的正丁醇相水分散液有明显的镇痛作用，能减少小鼠20min扭体次数（p<0.05或p<0.01），延长小鼠热板的潜伏期（p<0.05或p<0.01）。薄层层析实验表明组分D含甾醇、萜类物质，不含有氨基酸、多肽、蛋白质、黄酮、蒽醌和生物碱。
（5）正丁醇相AB-8柱层析后得到的组分II有较强的镇痛作用，组分II经过Sephadex LH-20柱层析得到的组分D也有明显的镇痛作用。
本论文参考国内外相关文献，从鼠妇醇提物中分离纯化出组分D,对鼠妇醇提物进行镇痛、抗炎、抗氧化药理活性研究。薄层层析实验只能证明组分D中含有化学物质的种类，未分离纯化出有抗炎镇痛活性的单体成分，而且今后需要对纯化的单体进行毒性以及药理研究。实验中使用的炎症模型单一，而且只是做了急性炎症的抗炎实验。若能结合中、晚期炎症以及免疫性炎症模型，研究鼠妇醇提物对急、慢性炎症和免疫性炎症的治疗效果，并在细胞和分子生物学方面作多方面的深入研究，才可以达到全面研究鼠妇醇提物抗炎药理作用的研究。
本论文用不同模型证实了鼠妇醇提物具有显著的镇痛作用，达到了研究新药镇痛疗效的要求，但没有对药物作用的具体部位作分析，在今后的研究工作中仍需要进一步完善。
7.2展望
（1）对鼠妇醇提物的组分D进行进一步的分离纯化，以期获得新结构的单体化合物。
（2）对得到的单体化合物进行活性测定，确定鼠妇中的抗炎镇痛成分。
（3）剖析具有活性的化合物的构效关系，进一步探讨药物作用的机理。
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