材料与方法
1 材料
1.1 动物
试验用 BALB/C(nu/nu) 裸鼠共 54 只，其中 14 只用于建立皮下移植瘤模型，40 只用于建立原位移植瘤模型。均不同期购自北京华阜康生物科技股份有限公司。裸鼠繁育在河北医科大学第四医院实验动物中心。裸鼠均 6~8 周龄，体重 18~27 g，均雄性，始终在 SPF 级屏障环境内进行试验。实验前 3 天购入裸鼠使其适应环境。
1.2 胃癌细胞株
人胃癌低分化腺癌细胞系 SGC-7901，购自中国科学院上海细胞研究所，培养在加入 10%小牛血清的 RPMI-1640 培养液中，常规传代。
1.3 实验用化疗药物
顺铂（CDDP） 山东齐鲁制药有限公司
氟尿嘧啶（5-Fu） 上海旭东海普药业有限公司
奥沙利铂（L-OHP） 江苏恒瑞医药股份有限公司
表阿霉素（eADM） 浙江海正制药公司
丝裂霉素（MMC） 浙江海正制药公司
长春新碱（VCR） 浙江海正制药公司
氨甲喋呤（MTX） 浙江海正制药公司
1.4 实验试剂
芬丹明 B（SRB） 美国 Sigma 公司
RPMI1640 美国 GIBICO 公司
胰蛋白酶 美国 GIBICO 公司
三氯醋酸（TCA） 国产分析纯冰醋酸 国产分析纯小牛血清 杭州四季青生物有限公司PBS 液 参照《细胞培养》配制
1.5 主要实验仪器及设备
CO2培养箱（TC 2323 型） 美国 SHELDON 公司
台式离心机 德国Heraeus公司
超净工作台 美国 BIOLOGICAL 公司
全自动高压蒸汽消毒器 日本三洋公司
酶标仪 DG3033 型 南京光电子管厂
2 方法
2.1 人胃癌细胞株 SGC7901 的复苏、培养和传代
将塑料细胞冻存管迅速投入 37～40℃水浴中，并充分摇动，使迅速融化(一般一分钟左右)。于超净工作台内实行无菌操作，打开冻存管，将细胞移入培养瓶，加 RPMI-1640 培养液，消毒瓶口，封口，置于 37℃，5%二氧化碳，95%湿度的细胞培养箱培养 24 小时后，换液一次，以去除二甲基亚砜。
亲本胃癌细胞 SGC7901 用含 10%小牛血清的 RPMI-1640 培养基进行培养。置入培养箱（温度 37℃，湿度 95%，含体积分数为 5%CO2）中，每天需换液一次，培养瓶细胞生长约 80%汇合时进行消化传代。对数生长期胃癌细胞用于实验。
选取生长状态好、贴壁完全的细胞，在超净工作台内将培养瓶中的培养基残液倒掉，加入 PBS 洗净残余培养基，倾去，加入 0.25%胰蛋白酶，消化贴壁生长的细胞，倒置显微镜下观察，待细胞变圆，倒掉胰蛋白酶，加入 2 倍于平时的新鲜培养基，用小吸管将细胞从瓶壁上吹打下来并吹打均匀，制成悬液，吸管吸出 1/2 悬液移入新备的培养瓶中，继续培养。
2.2 人胃癌细胞株 SGC7901 裸鼠移植瘤的建立
裸鼠皮下移植瘤模型的建立及鼠间传代培养胃癌细胞至对数期，经离心后收集细胞并配制成细胞浓度至少为3.5×105个/ml 的细胞悬液，取此细胞悬液 0.2ml 注射于两只裸鼠背部，接种约三周后瘤体生长至直径约 1cm 时剥取瘤体，清除纤维包膜，浸泡在培养基内将其切成 1×1×1mm 小组织块，切开未荷瘤裸鼠背部皮肤长约 1cm 小口，适当分离出皮下间隙，将小组织块植入后缝合皮肤，以此组织块接种 2 只，饲养约三周后移植瘤生长至直径 1cm 时再行取瘤接种，此过程反复 6 次，获得可在裸鼠体内稳定生长的胃癌细胞株 SGC7901 实体瘤组织块。
研究论文 人胃癌细胞原位移植裸鼠原发灶及肝转移灶细胞体外化疗药物敏感性的研究
结果...........8
附图...........10
附表..........15
讨论...........16
结论............18
参考文献........19
综述 胃癌裸鼠原位移植模型建立及体外肿瘤药物敏感试验的研究进展.....21
结 论
1. 通过将人胃癌新鲜组织块以“改良医用 OB 胶粘贴封闭法”种植于裸鼠胃壁，此模型方法较好地模拟了胃癌的发展过程，是一种在研究人类胃癌生长、转移及相应治疗方面的较理想的动物模型。
2.此 7 种化疗药物（VCR，5-Fu，MMC，CDDP，MTX，L-OHP，eADM）对胃癌原发灶、肝转移灶肿瘤细胞抑制率均低于 50%，但以 5-Fu 最高，故化疗时应以 5-Fu 为基础药物，再选用 1 种或几种其他药物联合应用。
3.化疗药物(eADM、MMC、L-OHP、VCR)对胃癌原发灶、肝转移灶抑制率不同，说明原发灶和肝转移灶肿瘤细胞有异质性变化。对于行胃癌术后病人，尤其对临床上常见的无法行根治性手术的晚期患者，可通过采用对转移灶和原发灶癌细胞的药敏试验筛选化疗药，从而更有效的提高术后化疗的效果。
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